Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. huwa wieħed mill-aktar manifatturi u fornituri ta' esperjenza ta' z-arg-leu-arg-gly-gly-amc cas 167698-69-3 fiċ-Ċina. Merħba għall-bejgħ bl-ingrossa bl-ingrossa z-arg-leu-arg-gly-gly-amc cas 167698-69-3 għall-bejgħ hawn mill-fabbrika tagħna. Servizz tajjeb u prezz raġonevoli huma disponibbli.
Z-ARG-LEU-ARG-GLY-GLY-AMC, formula molekulari C40H56N12O9, CAS 167698-69-3. Bħala peptide, Bħala peptide, għandu jkollu l-proprjetajiet ġenerali tas-sustanzi peptidi. Il-peptidi huma komposti ffurmati billi jgħaqqdu aċidi amminiċi permezz ta 'bonds peptidi u għandhom solubilità tajba fl-ilma minħabba li gruppi polari fuq il-katina tal-peptidi (bħal gruppi amino u karbossili) jistgħu jiffurmaw bonds tal-idroġenu ma' molekuli tal-ilma.
Barra minn hekk, is-sustanzi peptidi normalment ikollhom attività bijoloġika għolja u jistgħu jipparteċipaw f'diversi proċessi bijoloġiċi. Għandu firxa wiesgħa ta' applikazzjonijiet fil-bijokimika u r-riċerka medika, inkluż li jservi bħala sottostrat tal-peptide għal SARS-CoV PLpro, sondi fluworexxenti, għodod ta' screening ta' inibituri ta' rendiment għoli-, reaġenti tar-riċerka tal-interazzjoni tal-proteini, u reaġenti immunoloġiċi. Dawn l-applikazzjonijiet mhux biss jgħinu biex jiżvelaw l-essenza u l-mekkaniżmi tal-proċessi bijoloġiċi, iżda wkoll jipprovdu ideat u metodi ġodda għall-iżvilupp tad-droga u t-trattament tal-mard.
|
Tappijiet tal-fliexken u sufra personalizzati:
|
|
|
Formula Kimika |
C32H51N11O9 |
|
Quddiesa eżatta |
733 |
|
Piż Molekulari |
734 |
|
m/z |
733 (100.0%), 734 (34.6%), 735 (3.1%), 735 (2.7%), 734 (2.2%), 735 (1.8%), 734 (1.8%), 735 (1.4%) |
|
Analiżi Elementali |
C, 52.38; H, 7.01; N, 21.00; O, 19.62 |
Z-ARG-LEU-ARG-GLY-GLY-AMC, bħala sustanza peptide speċifika, għandha firxa wiesgħa ta 'applikazzjonijiet fil-bijokimika u r-riċerka medika.
L-ewwelnett
Ħafna drabi jintuża bħala substrat tal-peptide għal SARS-CoV PLpro (Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus Papaya bħal Protease). SARS-CoV huwa koronavirus, u PLpro tiegħu huwa enzima ewlenija fil-proċess ta' replikazzjoni tal-virus, li tipparteċipa fl-ipproċessar ta' proteini polimeriċi virali. Għalhekk, għandu valur ta' applikazzjoni importanti fl-istudju tal-mekkaniżmu ta' replikazzjoni tas-SARS-CoV, l-iskrinjar ta' mediċini antivirali, u l-iżvilupp tal-vaċċini.
It-tieni
Jista 'jservi wkoll bħala sonda fluworexxenti għal immaġini bijoloġiċi u riċerka dwar il-lokalizzazzjoni taċ-ċelluli. Minħabba l-preżenza tal-grupp AMC (amino methyl coumarin), dan il-peptide juri proprjetajiet ta 'fluworexxenza u jista' jarmu fluworexxenza taħt eċċitazzjoni. Dan jippermetti l-ittikkettar ta 'molekuli jew strutturi speċifiċi fiċ-ċelloli u t-tessuti, u b'hekk jiżvelaw il-bidliet dinamiċi tal-proċessi bijoloġiċi.
Barra minn hekk
Jista' jintuża wkoll għall-iskrinjar ta' inibitur ta'{0}}rendiment għoli u analiżi kontinwa. Fil-proċess ta 'żvilupp tad-droga, huwa kruċjali li jinstabu komposti li jistgħu effettivament jinibixxu l-attività ta' enzimi jew proteini speċifiċi. Bħala substrat tal-peptide għal PLpro, jista 'jintuża flimkien ma' inibituri potenzjali biex jevalwaw l-attività tagħhom billi jkejlu l-bidliet fir-rata tal-idroliżi tas-sottostrat. Dan il-metodu għandu l-vantaġġi ta ' throughput għoli, sensittività għolja, u speċifiċità għolja, li jistgħu jaċċelleraw ħafna l-proċess ta ' l-iskrining tad-droga.
Fl-aħħarnett
Barra minn hekk, jista 'jiġi applikat ukoll għar-riċerka immunoloġika. Is-sustanzi peptidi għandhom rwol importanti fis-sistema immuni u jistgħu jipparteċipaw fir-rispons immuni bħala antiġeni jew antikorpi. Is-sekwenza speċifika u l-istruttura ta' Z-ARG-LEU-ARG{-GLY{-AMC jistgħu jagħtuha immunoġeniċità jew immunoreattività, li tagħmilha adattata għall-preparazzjoni ta' antikorpi, vaċċini, jew reaġenti immunodijanjostiċi.
Z-ARG-LEU-ARG-GLY-GLY-AMChuwa peptide bijoattiv użat komunement fir-riċerka bijomedika u l-iżvilupp tad-droga. Dawn li ġejjin huma l-passi dettaljati u l-ekwazzjonijiet kimiċi korrispondenti tal-metodu tal-laboratorju għas-sintetizzazzjoni ta' Z-ARG-LEU-ARG-GLY-AMC:
Pass 1
Agħżel it-trasportatur xieraq:
Uża trasportatur xieraq (bħal reżina Rink Amide MBHA) biex tiffissa l-grupp AMC finali fuq it-trasportatur.
Pass 2
Sintesi sekwenzjali ta' ktajjen polipeptidi:
Bl-użu tal-istrateġija tas-sinteżi tal-fażi solida Fmoc-, ir-residwi Z-ARG-LEU-ARG-GLY-GLY ġew miżjuda b'mod sekwenzjali mat-tarf fiss tal-grupp AMC fuq it-trasportatur. Iż-żieda ta’ kull residwu tinkludi l-passi li ġejjin:
-Deprotezzjoni: Neħħi l-grupp protettiv Fmoc u esponi l-grupp amino ħieles tal-aċidu amminiku.
-Igganċjar: Il-formazzjoni ta 'rabtiet peptidi ġodda bejn esteri ta' amino aċidi attivati u gruppi amino ħielsa fuq it-trasportatur.
Pass 3
Neħħi l-bażi protettiva:
Wara li titlesta s-sintesi tal-katina tal-polypeptide, neħħi l-grupp protettiv Fmoc fit-tarf N-u esponi l-grupp amino ħieles fit-tarf.
Pass 4
Neħħi l-ktajjen tal-polipeptidi:
Neħħi l-katina tal-polypeptide mit-trasportatur u fl-istess ħin neħħi l-gruppi protettivi kollha tal-katina tal-ġenb.
Pass 5
Aminoaċilazzjoni:
Dewweb il-peptide sintetizzat f'solvent xieraq, bħal DMF, u żid ammont xieraq ta 'formamide (HONHCOCH3) għal reazzjoni ta' carbamoylation. Dan il-pass se jintroduċi Z-gruppi protettivi fuq il-ktajjen tal-ġenb ta 'kull residwu ta' arginine.
Pass 6
Tneħħija tal-bażi protettiva Z:
Uża reaġenti protettivi xierqa, bħal TFA (aċidu trifluoroacetic), biex tneħħi l-grupp protettiv Z-mill-fdal ta' l-arginine u tesponi r-radikali ħielsa fuq il-ktajjen tal-ġenb tagħha.
Pass 7
Aminometilazzjoni:
Dewweb il-peptide bil-grupp protettiv Z imneħħi f'solvent xieraq, żid ammont xieraq ta 'metanol amine (MeNH2), u wettaq reazzjoni ta' metilazzjoni amino. Dan il-pass se jintroduċi metilazzjoni fuq il-ktajjen tal-ġenb ta 'kull residwu ta' arginine.
Pass 8
Purifikazzjoni ta' prodotti mhux raffinati:
Bl-użu ta' tekniki kromatografiċi xierqa bħall-kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja-reverse phase, il-peptidi sintetizzati jiġu ppurifikati minn prodotti mhux raffinati biex jitneħħew impuritajiet u sustanzi mhux reazzjoni.
Pass 9
Purifikazzjoni:
Purifikazzjoni ulterjuri tal-prodott mhux raffinat titwettaq bl-użu ta' tekniki kromatografiċi ta'-livell ogħla bħal kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja-reverse phase jew kromatografija tal-kolonna biex jinkiseb il-prodott fil-mira b'purità ogħla.
Pass 10
Identifikazzjoni:
Uża tekniki tal-ispettrometrija tal-massa (bħal analiżi tal-ispettrometrija tal-massa) u tekniki tal-kromatografija (bħal-kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja) biex tidentifika l-istruttura u l-purità tal-peptidi purifikati.
Z-ARG-LEU-ARG-GLY-GLY-AMC huwa l-"gold standard" għall-iskoperta tal-protease
Fl-oqsma tal-bijokimika u r-riċerka tal-bijoloġija molekulari, l-iskoperta tal-attività tal-protease hija pass ewlieni fid-deċifrar tas-sinjalar taċ-ċelluli, il-mekkaniżmi tal-mard u l-iżvilupp tad-droga. Metodi ta 'skoperta tradizzjonali, bħal metodi kolorimetriċi u radjutikkettati, huma diffiċli biex jissodisfaw ħtiġijiet moderni ta' riċerka minħabba sensittività baxxa, tħaddim kumpless, jew perikli potenzjali għas-sikurezza.Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMC(imqassar bħala Z-LRGG-AMC), bħala sottostrat peptide tikkettat fluworexxenti, sar l-"istandard tad-deheb" għall-iskoperta tal-protease minħabba s-sensittività għolja, l-ispeċifiċità, u l-kapaċità ta' monitoraġġ-ħin reali tiegħu.
Mekkaniżmu ta 'azzjoni: konverżjoni preċiża ta' sinjali fluworexxenti
Il-proċess ta' azzjoni ta' Z-LRGG-AMC jista' jinqasam fi tliet passi:
Proteases, bħal SARS-CoV papain bħal protease PLpro, jingħaqdu speċifikament mas-sekwenzi tal-peptidi sottostrat permezz tat-trijade katalitika (Cys His Asp) fiċ-ċentru attiv. Pereżempju, PLpro jagħti prijorità lir-rikonoxximent tas-sekwenzi Arg-X-Arg{-Gly, fejn X huwa aċidu amminiku idrofobiku (bħal Leu).
Protease tikkatalizza l-idroliżi ta 'rabtiet peptidi bejn Arg Leu, u tirrilaxxa gruppi fluworexxenti AMC. Il-kinetika tar-reazzjoni tat-tqattigħ tikkonforma mal-ekwazzjoni Mie, u l-intensità tal-fluworexxenza tiżdied b'mod lineari maż-żmien, bl-inklinazzjoni tirrifletti l-attività tal-enzima.
Monitoraġġ f'ħin reali tal-intensità tal-emissjoni tal-fluworexxenza ta '460nm bl-użu ta' spettrofotometru tal-fluworexxenza jew qarrej tal-mikroplate. Pereżempju, fir-riċerka tas-SARS CoV, l-attività PLpro tista' tiġi analizzata kwantitattivament billi jinstab is-sinjal tal-fluworexxenza ġġenerat mill-qsim ta' Z-LRGG-AMC, b'sensittività fil-livell molari Dana.
Xenarju ta' applikazzjoni: Għodod xjentifiċi b'ħafna oqsma
Riċerka dwar protease virali: għodda ewlenija għall-iżvilupp ta 'mediċini kontra l-koronavirus
PLpro huwa responsabbli għall-ipproċessar tal-poliproteini tal-virus u l-ħarba immuni ospitanti, u huwa mira ewlenija għal mediċini antivirali. Z-LRGG-AMC, bħala sottostrat speċifiku ta' PLpro, għandu effiċjenza ta' qsim aktar minn tliet darbiet ogħla minn sottostrati tradizzjonali bħal Z-Gly-Gly Arg AMC. Fl-iskrinjar tad-droga, mediċini antivirali potenzjali jistgħu jiġu identifikati malajr billi tiġi identifikata r-rata ta' inibizzjoni ta' komposti fuq il-qsim ta' PLpro ta' Z-LRGG-AMC.
For example, a study used this substrate to screen candidate molecules with inhibition rate>90% minn librerija ta '100000 kompost, li jipprovdu appoġġ ewlieni għall-iżvilupp ta' mediċini antivirali bħal remdesivir. Billi titqabbel l-effiċjenza tat-tqattigħ ta 'razez differenti tal-virus PLpro fuq Z-LRGG-AMC, jista' jiġi żvelat l-effett tal-varjazzjoni tal-virus fuq l-attività tal-protease. Pereżempju, ir-rata ta' qtugħ ta' SARS-CoV{-2 PLpro fuq Z-LRGG{-AMC hija 1.5 darbiet aktar mgħaġġla minn dik ta' SARS-CoV PLpro, li jissuġġerixxi li jista' jkollu kapaċità regolatorja immuni tal-host aktar b'saħħitha.
Riċerka dwar Ubiquitinase: Sonda għar-Regolament tad-Degradazzjoni tal-Proteina
IPaseT u DUBs oħra jirregolaw id-degradazzjoni tal-proteini billi jaqtgħu s-sekwenza C-terminal tal-ubiquitin. Z-LRGG-AMC jissimula l-istruttura C-terminali ta 'ubiquitin, b'valur kcat/Km ta' 18 M ⁻¹ s ⁻¹, li jagħmilha substrat ideali għall-istudju tal-kinetika DUB. Pereżempju, fir-riċerka dwar il-kanċer, ir-relazzjoni bejn l-iżbilanċ tal-omeostażi tal-proteini u l-progressjoni tat-tumur tista 'tiġi evalwata billi tiġi identifikata l-attività tal-qsim ta' DUB fuq Z-LRGG-AMC fiċ-ċelloli tat-tumur.
Flimkien mat-teknoloġija tat-trasferiment tal-enerġija tar-reżonanza tal-fluworexxenza (FRET), Z-LRGG-AMC jista' jintuża għal traċċar-ħin reali ta' proċessi ta' modifika ta' ubikwitinazzjoni intraċellulari. Pereżempju, f'mudell ta 'mard newrodeġenerattiv, l-iskoperta tal-livell ta' ubikwitinazzjoni ta 'alpha sinukleina tiżvela l-assoċjazzjoni bejn l-aggregazzjoni tagħha u d-disfunzjoni tal-proteasome.
Skrinjar tad-droga b'rendiment għoli: tħaffef l-iżvilupp ta 'drogi ġodda
Fi pjanċa 384 bir, Z-LRGG-AMC tħallat mal-kompost tat-test u l-inibituri tal-enżimi ġew skrinjati malajr b'bidliet fis-sinjali tal-fluworexxenza. Dan il-metodu għandu throughput għoli (jista 'jiskrinja eluf ta' komposti kuljum) u prezz baxx (spiża ta 'pori wieħed<0.1 USD), and has become a standard process for drug development. By changing the substrate concentration, the Km (Michaelis constant) and Vmax (maximum reaction rate) of the enzyme on Z-LRGG-AMC were determined, providing a theoretical basis for inhibitor design. For example, a study used this substrate to determine a Km value of 12 μ M for PLpro, providing key data for optimizing inhibitor affinity.
Mistoqsijiet Frekwenti
Huwa kompletament maħlul fid-DMSO jew jidher li jinħall? --Scam li huwa inviżibbli għall-għajn
+
-
Huwa "kaptan tal-moħbi" f'DMSO - ċar meta jinħall għall-ewwel darba, iżda taħt l-induzzjoni ta 'traċċi ta' ilma, tippreċipita bil-mod preċipitati nanoskala li huma kompletament mhux rikonoxxibbli għall-għajn. Għalkemm id-dejta dwar is-solubilità tiddikjara "solubbli f'DMSO", is-sottostrati tal-peptidi huma suxxettibbli ħafna għal traċċi residwi ta' ilma f'DMSO. L-għarfien veru kiesaħ huwa li s-solvent l-aktar adattat tiegħu mhuwiex DMSO, iżda soluzzjoni ta 'aċidu aċetiku ta' 10%. Din l-informazzjoni ewlenija rarament tidher fuq paġni regolari tal-prodotti, u hija "trick" biex issolvi l-problemi ta '"riproduċibbiltà fqira tar-riżultati" u "drift tas-sinjal".
Ma jibżax mid-dawl, iżda mill-ħsara fiżika waqt "l-iffriżar"? --Is-"sensazzjoni ta 'uġigħ" speċjali tal-gruppi AMC
+
-
L-iffriżar u t-tidwib ripetuti huwa ekwivalenti għal "tortura fiżika" għaliha, anki jekk ma tiddegradax, il-molekuli aggregati jitilfu l-attività tas-sottostrat. Għalkemm il-grupp AMC innifsu huwa reżistenti għad-dawl, il-peptide huwa suxxettibbli ħafna għal aggregazzjoni irriversibbli minħabba kompressjoni tal-kristalli tas-silġ waqt ċikli ripetuti ta' iffriżar-tidwib. Rakkomandazzjoni standard tal-industrija: Is-soluzzjoni tista 'tinħażen għal 6 xhur f'-80 grad C, u għal xahar biss f'-20 grad C. Ladarba jinħall, il-likur omm li jifdal għandu jiġi ppakkjat jew mormi immedjatament. In-nuqqas f'daqqa ta 'sinjal li ltqajt magħhom huwa probabbli minħabba l-fenomenu ta' "mewt falza" ikkawżat minn ċikli ta 'friża-tidwib.
Min hu l-"iben bijoloġiku" ta' Z-Leu-Arg Gly Gly AMC?
+
-
Z-LRGG-AMC (tetrapeptide) huwa "substrat universali" għall-ubiquitinase, filwaqt li Z-RLRGG-AMC (pentapeptide) huwa "ċ-ċavetta speċjalizzata" għall-eteropeptidase T u l-virus SARS PLpro.
Għalkemm it-tnejn jissejħu komunement bħala "sottostrati ta' l-enżimi ubiquitin", huma distinti ħafna:
Z-LRGG-AMC: jissimula t-terminal C-tal-ubiquitin u huwa prinċipalment użat għall-iskoperta universali tal-familja UCH (bħal UCH-L3).
Z-RLRGG-AMC: Arg addizzjonali ġie miżjud, li jagħmilha sottostrat preferut speċifiku għad-deubiquitinase USP5 u l-koronavirus SARS PLpro.
Għaliex id-DTT (dithiothreitol) irid jiġi miżjud mal-buffer tar-reazzjoni? --Is-'simbolu kimiku li jsalva l-ħajja' taċ-ċisteina attiva
+
-
Jekk ma jiżdiedx ammont suffiċjenti ta 'aġent li jnaqqas (bħal DTT), is-sit tal-qsim tiegħu "sadid" fi ftit minuti, u jdawwar is-sottostrat f'"materja mejta".
L-idroliżi tagħha tiddependi fuq iċ-ċisteina ħielsa (Cys) fiċ-ċentru attiv tal-enzima. Il-grupp thiol jiġi ossidizzat faċilment bl-arja biex jifforma rabtiet disulfide (- S-S -), li jwasslu għal inattivazzjoni tal-enzimi. Is-sistema ta 'reazzjoni standard (bħal buffer HEPES, pH 7.4) għandu jkun fiha 1-5 mM DTT. Din ir-'regola mhux miktuba 'spiss tissemma biss f'annotazzjonijiet ta' karattri żgħar jew dettalji metodoloġiċi, u hija l-aktar ħati komuni li twassal biex l-enzimi ta' esperimenti novizzi jkunu inattivi irrispettivament minn kemm huma miżjuda'.
It-tags Popolari: z-arg-leu-arg-gly-gly-amc cas 167698-69-3, fornituri, manifatturi, fabbrika, bl-ingrossa, xiri, prezz, bl-ingrossa, għall-bejgħ