Peptide tal-aċetat tal-gonadorelin

Is-sinteżi tal-fażi likwida tgħaqqad gradwalment l-aċidi amminiċi permezz ta 'strateġija ta' grupp protettiv f'soluzzjoni, adattata għas-sintesi ta 'ktajjen qosra tal-polipeptidi li fihom strutturi speċjali bħal bonds disulfide. Il-qalba tinsab fl-għażla u s-sekwenza tat-tneħħija ta 'gruppi protettivi biex jiġu evitati reazzjonijiet sekondarji.

Deprotezzjoni u purifikazzjoni:
Bl-użu tat-TFA biex jitneħħew il-gruppi BOC u l-piridina biex jitneħħew il-gruppi FMOC, inkiseb il-peptidi lineari pyrhistrtyrglyleuargproglynh2.
Purifikazzjoni minn HPLC u ffriżar - tnixxif biex tinkiseb gonarelin mhux raffinat.

Vantaġġi: Kontroll preċiż tal-kundizzjonijiet ta 'reazzjoni, adattat għal sinteżi kumplessa tal-katina tal-peptidi; M'hemmx bżonn ta 'trasportaturi ta' fażi solidi, li jnaqqsu l-ispejjeż.
Limitazzjonijiet: Il-passi huma ingombranti u jeħtieġu purifikazzjonijiet multipli; L-intermedji tar-reazzjoni jeħtieġ li jiġu ppurifikati biex jestendu ċ-ċiklu tal-produzzjoni.

Ċertu studju uża likwidu - metodu ta 'sinteżi tal-fażi biex jottimizza l-formula tar-reaġent tal-qtugħ (88% TFA +5% anise sulfide +5% ilma +2}% etanedithiol), li żied ir-rendiment mhux raffinat għal 91.8% u l-purità tal-prodott għal aktar minn 99%.

Il-formula molekulari ta 'l-aċetat ta' gonarelin hija c ₅₇ h ₇₉ n ₁₇ o ₁₅, b'piż molekulari ta '1242.36 DA. L-istruttura ewlenija tagħha hija katina ta 'decapeptide, li tikkonsisti f'sekwenzi ta' aċidu amminiku li ġejjin:

5 - oxopropyl - l - histoyl - l {-} triptophan {- l {- triptophan-}}}}}}}}}}} - Tryptophan {{ 0}} l - tyrosyl - glycyl - l - leucyl - l -}} arginil {- l {{18} Prolyl-GlycinaMide.
F'din l-istruttura, l-ewwel 5 - oxoproline (aċidu piroglutamiku) jifforma struttura ċiklika, li jsaħħaħ l-istabbiltà molekulari; Glycine (Gly) fil-pożizzjoni 6 u glycinamide (Gly - NH ₂) fil-pożizzjoni 10 huma segmenti flessibbli li jagħtu l-molekula bi flessibilità konformazzjonali; It-tielet triptofan (TRP) u l-ħames tyrosine (Tyr) fihom ċrieki aromatiċi u jistgħu jipparteċipaw f'interazzjonijiet intermolekulari permezz ta 'stivar π-π.
L-introduzzjoni ta 'forma ta' aċetat (CH3 COO ⁻) mhux biss ittejjeb is-solubilità tal-mediċina (b'solubilità ta 'l-ilma sa 25 mg / mL), iżda wkoll torbot mal-gruppi amino jew karbossil tal-katina permezz ta' bonds joniċi, li tifforma struttura ta 'melħ stabbli u tnaqqas ir-riskju ta' degradazzjoni tal-katina tal-peptidi waqt il-ħażna.

L-abbiltà ta 'gruppi ta' idrossil, amminiku, karbossiliku biex jiffurmaw bonds ta 'l-idroġenu ma' molekuli ta 'l-ilma teħtieġ ħażna f'ambjent niexef biex tevita li tinġabar jew degradazzjoni.
Solubilità:
Dan il-kompost għandu solubilità għolja fl-ilma (25 mg / ml), huwa kemmxejn solubbli fil-metanol, u jista 'jinħall kompletament f'soluzzjoni ta' 1% aċetiku. Is-solubilità tagħha hija affettwata b'mod sinifikanti mill-pH: taħt kondizzjonijiet aċidużi (bħal 1% aċidu aċetiku), il-protonazzjoni tal-karbossilili tnaqqas ir-repulsjoni elettrostatika intermolekulari u tippromwovi x-xoljiment; F'ambjenti newtrali jew alkalini, id-deprotonazzjoni ta 'gruppi karbossili tista' tikkawża aggregazzjoni intermolekulari, li twassal għal tnaqqis fis-solubilità.

Punt ta 'tidwib u stabbiltà termali:
Dejta sperimentali turi li l-punt tat-tidwib huwa ogħla minn 155 grad C (dekompożizzjoni), li jindika stabbiltà termali qawwija. Madankollu, temperaturi għoljin jistgħu jikkawżaw idroliżi tal-bond tal-peptidi jew ossidazzjoni tal-katina tal-ġenb tal-aċidu amminiku, u għalhekk il-ħażna attwali trid tkun ikkontrollata fil-firxa ta '-20 grad C sa 8 grad Ċ biex tittardja d-degradazzjoni.

Karatteristiċi spettrali:
L-ispettru ta 'assorbiment tal-UV juri quċċata ta' assorbiment massimu ta '278 nm, li jikkorrispondi għas-sistema konjugata taċ-ċirku aromatiku ta' triptofan u tirosina. Din il-karatteristika tista 'tintuża għal analiżi kwantitattiva (bħal determinazzjoni spettrofotometrika tal-kontenut), jew biex titqabbel il-purità mal-istandards ta' referenza permezz ta 'kromatografija b'saff irqiq (TLC).

Stabbiltà idrolitika
Relattivament stabbli taħt kondizzjonijiet aċidużi jew newtrali, iżda suxxettibbli għal idroliżi ta 'bond peptide f'ambjenti alkalini. Pereżempju, taħt l-azzjoni ta 'bażijiet b'saħħithom (bħal NaOH), ir-rabta tal-peptide bejn is-6 glycine u s-7 leucine tista' tinkiser, u tiġġenera frammenti ta 'peptidi qosra. Barra minn hekk, iċ-ċirku indole tat-tielet triptofan huwa suxxettibbli għal ftuħ ta 'ċirku f'kundizzjonijiet ħfief jew ossidattivi, li jwassal għal telf ta' attività tad-droga.

Fil-preżenza ta 'ossiġnu jew radikali ħielsa, dawn il-gruppi funzjonali jistgħu jgħaddu minn reazzjonijiet ta' ossidazzjoni, li jiġġeneraw perossidi jew derivattivi ta 'idrossiliku, li min-naħa tagħhom jikkawżaw degradazzjoni tal-katina. Għalhekk, l-anti-ossidanti (bħal vitamina Ċ) huma spiss miżjuda mal-formulazzjonijiet biex itejbu l-istabbiltà.

Stabbiltà ħafifa
Sensittività għad-dawl, speċjalment dawl ultravjola (200-400 nm), tista 'tfixkel direttament is-sistema konjugata ta' triptofan jew indirettament tiskatta degradazzjoni ossidattiva permezz tal-ġenerazzjoni ta 'radikali ħielsa. L-injezzjonijiet kliniċi għandhom jiġu ppakkjati fi fliexken tal-ħġieġ kannella u maħżuna 'l bogħod mid-dawl.

Attività li torbot ir-riċetturi
Billi torbot ma 'affinità għolja mar-riċettur ta' GnRH fil-glandola pitwitarja anterjuri permezz tal-għaxar struttura tagħha, is-sinjalar intraċellulari (bħall-passaġġ CAMP / PKA) huwa attivat, li jwassal għar-rilaxx ta 'gonadotropini (FSH, LH). L-attività li torbot tagħha tiddependi fuq:
Il-komplementarjetà bejn l-istruttura ċiklika tal-ewwel 5-oxoproline u l-but tar-riċettur;
L-interazzjoni π - π bejn iċ-ċirku aromatiku tat-tielet triptofan u r-reġjun idrofobiku tar-riċettur;
It-tariffa pożittiva tat-8 arginine hija attirata elettrostatikament lejn ir-residwu aċiduż tar-riċettur.

Mekkaniżmu Bifasiku
Meta jingħata kontinwament fi żmien qasir, jistimula r-rilaxx ta 'FSH / LH mill-glandola pitwitarja u jżid il-livelli ta' ormoni tas-sess; L-amministrazzjoni fit-tul twassal għal inibizzjoni tas-sekrezzjoni ta 'FSH / LH minħabba d-desensibilizzazzjoni tar-riċetturi, li fl-aħħar tnaqqas l-ormoni tas-sess għal-livelli ta' kastrazzjoni. Din il-karatteristika tagħmilha alternattiva għall-kastrazzjoni kirurġika fit-trattament tal-kanċer tal-prostata, filwaqt li tnaqqas ir-riskju ta 'kumplikazzjonijiet kirurġiċi.

Prodotti ta 'degradazzjoni polimorfa:
Matul il-proċess metaboliku fil-ġisem, diversi metaboliti jistgħu jiġu ġġenerati permezz ta 'idroliżi enżimatika (bħal azzjoni ta' peptidase) jew degradazzjoni mhux enżimatika (bħal ossidazzjoni). Pereżempju, is-6 glycine jista 'jiġi idrolizzat biex jiġġenera framment ta' disa 'peptidi; L-ossidazzjoni ta 'triptofan fit-tielet pożizzjoni tiġġenera derivattivi ta' idrossili. L-attività ta 'dawn il-metaboliti teħtieġ li tiġi identifikata permezz ta' spettrometrija tal-massa (LC - ms) jew reżonanza manjetika nukleari (NMR) biex tevalwa s-sigurtà tagħhom.
Interazzjonijiet tal-mediċina:
Meta jintużaw flimkien ma 'mediċini li fihom joni tal-metall (bħal ċerti antibijotiċi), is-solubilità jew l-attività ta'Peptide tal-aċetat tal-gonadorelinjista 'jitnaqqas minħabba ċ-ċelazzjoni. Barra minn hekk, il-forma tal-melħ aċiduż tagħha tista 'tgħaddi minn reazzjonijiet ta' newtralizzazzjoni ma 'mediċini alkalini (bħal anti-istaminiċi), u għandhom jiġu evitati injezzjonijiet imħallta.