IPTG, CAS 367-93-1, struttura kimika komposta minn isopropyl - Huwa magħmul minn gruppi D-thiogalactoside u fosfat. Fost dawn, - D-thiogalactoside huwa analogu tal-galactose, li fih l-atomu tal-kubrit jissostitwixxi l-atomu tal-ossiġnu. Din l-istruttura speċjali tal-glycoside tippermetti lill-IPTG li jorbot mad-DNA u jinduċi l-espressjoni tal-ġeni. IPTG għandu solubilità baxxa fl-ilma, iżda jista 'jinħall sew f'salina fiżjoloġika u buffer tal-fosfat. Huwa aċiduż b'valur pKa ta '4.5, li huwa relatat mal-grupp tal-fosfat fl-istruttura molekulari tiegħu. Mhux faċli li tikkristallizza f'ilma pur, iżda tista 'tifforma kristalli f'soluzzjonijiet ta' konċentrazzjoni għolja jew meta jiġu miżjuda komposti oħra. Minħabba l-kapaċità tiegħu li jinduċi espressjoni ta 'proteini batterjali, IPTG huwa sensittiv għal ċerti mikro-organiżmi. Pereżempju, xi batterji jistgħu jieqfu jikbru jew imutu wara l-espożizzjoni għal IPTG.
(Link tal-Prodott 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1}.html ）
(Link tal-Prodott 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-powder-cas-367-93-1}.html ）
Is-sinteżi enżimatika tal-IPTG hija metodu li juża l-enzimi biex jikkatalizza r-reazzjoni ta' galactose u uridine triphosphate biex jipproduċi gruppi isopropyl- - Metodu għal D-thiogalactoside. Dawn li ġejjin huma l-passi dettaljati u l-ekwazzjonijiet kimiċi ta 'dan il-metodu:
1. Xogħol ta' tħejjija:
Ipprepara r-reaġenti u t-tagħmir meħtieġa, inklużi galactose, uridine triphosphate, enzimi, buffer, kontenituri ta 'reazzjoni, kontrolluri tat-temperatura, eċċ.
Żid galactose u uridine triphosphate f'ċertu proporzjon mar-reċipjent tar-reazzjoni.
Żid ammont xieraq ta' enzima u buffer biex iżżomm l-istabbiltà tal-pH tas-sistema ta' reazzjoni.
Poġġi l-kontenitur tar-reazzjoni fil-kontrollur tat-temperatura u ssettja t-temperatura ta 'reazzjoni xierqa.
2. Proċess ta 'reazzjoni
2.1 Ħallat is-sistema ta' reazzjoni b'mod uniformi f'temperatura xierqa.
2.2 Żomm it-temperatura u l-istabbiltà tal-pH tas-sistema ta 'reazzjoni u kompli ħawwad.
2.3 Teħid ta' kampjuni u ttestjar ta' isopropyl f'intervalli regolari- - Il-produzzjoni ta' D-thiogalactoside.
2.4 Aġġusta d-dożaġġ ta 'l-enzima u l-ħin ta' reazzjoni bbażati fuq ir-riżultati tat-test biex tikseb l-aħjar produzzjoni tal-grupp isopropyl- - D-thiogalactoside.
3. Ekwazzjoni kimika
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + UDP → C8H6Br4O2 + C10H15N5O10P2 + C3H7N
Fosthom, ATP jirrappreżenta adenosine triphosphate, UDP jirrappreżenta uridine diphosphate, u Pi jirrappreżenta fosfru inorganiku. Din l-ekwazzjoni kimika tirrappreżenta l-formazzjoni ta' gruppi isopropyl minn galactose u uridine triphosphate taħt l-azzjoni ta' enżimi- - D-thiogalactoside u ADP, kif ukoll Pi.
4. Separazzjoni u purifikazzjoni
Wara li titlesta r-reazzjoni, is-soluzzjoni tar-reazzjoni tiġi ffiltrata jew ċentrifugata biex tneħħi l-galattożju mhux reaġit, uridine triphosphate, u impuritajiet oħra.
L-użu ta' tekniki xierqa ta' separazzjoni u purifikazzjoni, bħal skambju joniku, kromatografija, eċċ., biex tkompli tippurifika l-isopropyl- - D-thiogalactoside.
Iwettaq ittestjar ta 'kwalità, bħal kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja, spettrometrija tal-massa, eċċ., biex tiżgura li l-kwalità tal-prodott tissodisfa r-rekwiżiti.
5. Sommarju
Il-metodu ta 'sinteżi enżimatika ta' IPTG għandu selettività, rendiment u purità għolja, kif ukoll ħbiberija ambjentali u sigurtà għolja. F'dan il-metodu, it-tip, il-konċentrazzjoni, il-valur tal-pH, it-temperatura u kundizzjonijiet oħra tal-enzima għandhom impatt sinifikanti fuq ir-riżultati tar-reazzjoni, u huma meħtieġa kontroll u aġġustament preċiżi. Barra minn hekk, il-passi tas-separazzjoni u l-purifikazzjoni huma wkoll kruċjali biex jiżguraw il-kwalità u l-purità tal-prodott. F'operazzjoni prattika, aġġustamenti u ottimizzazzjonijiet għandhom isiru skond ċirkostanzi speċifiċi biex jinkiseb l-aħjar grupp isopropyl- - Produzzjoni u kwalità ta 'D-thiogalactoside.
Il-metodu ta 'reazzjoni b'ħafna komponenti ta' IPTG huwa reazzjoni li tutilizza l-parteċipazzjoni ta 'komponenti multipli biex jissintetizza l-Isopropyl- - Metodu għal D-thiogalactoside. Dawn li ġejjin huma l-passi dettaljati u l-ekwazzjonijiet kimiċi ta 'dan il-metodu:
1. Xogħol ta’ tħejjija
Ipprepara r-reaġenti u t-tagħmir meħtieġa, inklużi galactose, uridine triphosphate, adenosine triphosphate, sodium thiosulfate, enżimi, buffer, kontenituri ta 'reazzjoni, kontrolluri tat-temperatura, eċċ.
Żid galactose, uridine triphosphate, adenosine triphosphate, u sodium thiosulfate f'ċertu proporzjon mar-reċipjent tar-reazzjoni.
Żid ammont xieraq ta' enzima u buffer biex iżżomm l-istabbiltà tal-pH tas-sistema ta' reazzjoni.
Poġġi l-kontenitur tar-reazzjoni fil-kontrollur tat-temperatura u ssettja t-temperatura ta 'reazzjoni xierqa.
2. Proċess ta 'reazzjoni
2.1 Ħallat is-sistema ta' reazzjoni b'mod uniformi f'temperatura xierqa.
2.2 Żomm it-temperatura u l-istabbiltà tal-pH tas-sistema ta 'reazzjoni u kompli ħawwad.
Matul il-proċess ta 'reazzjoni, għandha tingħata attenzjoni għall-osservazzjoni tal-progress tar-reazzjoni, l-aġġustament tal-ammont ta' enzima u l-ħin ta 'reazzjoni f'waqtu biex tinkiseb l-aħjar produzzjoni tal-grupp isopropyl- - D-thiogalactoside.
3. Ekwazzjoni kimika
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + C9H14N2O12P2 + C10H15N5O10P2 → C8H6Br4O2 + C3H7N
Fost dawn, ATP jirrappreżenta adenosine triphosphate, UDP jirrappreżenta uridine diphosphate, ADP jirrappreżenta adenosine diphosphate, u Pi jirrappreżenta fosfru inorganiku. Din l-ekwazzjoni kimika tirrappreżenta l-formazzjoni ta' gruppi isopropyl minn galactose, uridine triphosphate, u adenosine triphosphate taħt l-azzjoni ta' enżimi- - D-thiogalactoside u Pi.
4. Separazzjoni u purifikazzjoni
Wara li titlesta r-reazzjoni, is-soluzzjoni tar-reazzjoni tiġi ffiltrata jew ċentrifugata biex tneħħi l-galattożju mhux reaġit, uridine triphosphate, adenosine triphosphate, u impuritajiet oħra.
L-użu ta' tekniki xierqa ta' separazzjoni u purifikazzjoni, bħal skambju joniku, kromatografija, eċċ., biex tkompli tippurifika l-isopropyl- - D-thiogalactoside.
Iwettaq ittestjar ta 'kwalità, bħal kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja, spettrometrija tal-massa, eċċ., biex tiżgura li l-kwalità tal-prodott tissodisfa r-rekwiżiti.
5. Sommarju
Il-metodu ta 'reazzjoni b'ħafna komponenti ta' IPTG jutilizza l-vantaġġi ta 'komponenti multipli li jipparteċipaw fir-reazzjoni flimkien, b'selettività, rendiment u purità għolja. F'dan il-metodu, minbarra l-materja prima ewlenija bħal galactose, uridine triphosphate, u enzimi, komponenti awżiljarji bħal adenosine triphosphate u sodium thiosulfate huma miżjuda wkoll biex jippromwovu r-reazzjoni u jtejbu l-kwalità tal-prodott. Barra minn hekk, il-passi tas-separazzjoni u l-purifikazzjoni huma wkoll kruċjali biex jiżguraw il-kwalità u l-purità tal-prodott. F'operazzjoni prattika, aġġustamenti u ottimizzazzjonijiet għandhom isiru skond ċirkostanzi speċifiċi biex jinkiseb l-aħjar grupp isopropyl- - Produzzjoni u kwalità ta 'D-thiogalactoside. Fl-istess ħin, għandha tingħata attenzjoni għall-kontroll tal-kundizzjonijiet ta 'reazzjoni bħat-temperatura, il-valur tal-pH, u d-dożaġġ tal-enżimi biex jinkiseb l-aħjar effett ta' reazzjoni.