BIS-TRIS Buffer CAS 6976-37-0

Huwa buffer bijoloġiku effiċjenti b'firxa effettiva ta 'buffering tal-pH ta' 5.8-7.2 u valur pKa ta '6.5 (25 grad). F'esperimenti bijokimiċi, ħafna bijomolekuli bħal proteini u aċidi nuklejċi huma sensittivi ħafna għall-valuri tal-pH, u anke bidliet żgħar fil-pH jistgħu jaffettwaw l-istruttura u l-funzjoni tagħhom. BIS-TRIS jista 'jistabbilizza l-valur tal-pH tas-soluzzjoni f'din il-firxa tal-pH, u jipprovdi ambjent stabbli għal reazzjonijiet bijokimiċi. Fil-proċess ta' separazzjoni u purifikazzjoni tal-proteini, il-konformazzjoni naturali tal-proteina tista 'tinżamm biex tevita denaturazzjoni jew preċipitazzjoni minħabba bidliet fil-pH.

Per eżempju, f'tekniki ta 'purifikazzjoni tal-proteini bħal kromatografija ta' skambju joniku u kromatografija ta 'affinità, l-użu ta'BIS-TRIS bufferjista 'jiżgura li l-interazzjoni bejn il-proteini u l-midja tal-kromatografija sseħħ taħt kundizzjonijiet ta' pH stabbli, u b'hekk ittejjeb l-effiċjenza u l-purità tal-purifikazzjoni.

Fl-analiżi tal-attività tal-enżimi, l-attività tal-enżimi ħafna drabi tiddependi fuq ambjent speċifiku tal-pH. Il-valur tal-pH tas-sistema ta' reazzjoni jista' jiġi kkontrollat ​​b'mod preċiż biex l-enzima tkun tista' teżerċita attività katalitika taħt l-aħjar kundizzjonijiet tal-pH, u b'hekk titkejjel b'mod preċiż l-attività tal-enzima. Dan huwa ta 'sinifikat kbir għall-istudju tal-proprjetajiet, mekkaniżmi ta' azzjoni, u l-iżvilupp ta 'preparazzjonijiet ta' enzimi ta 'enzimi.

BIS-TRIS għandu l-abbiltà li jikkoordina ma' diversi jonji tal-metall u jifforma kumplessi stabbli, bħal Zn ² ⁺ - BIS-TRIS, Mn ² ⁺ - BIS-TRIS, eċċ. Dawn il-kumplessi tal-jone tal-metall għandhom rwol importanti fl-istudju tal-istruttura u l-funzjoni tal-bijomolekuli tal-metall spiss jaġixxu bħala analiżi strutturali tal-proteini. kofatturi biex jipparteċipaw fil-formazzjoni ta 'ċentri attivi fil-proteini. Billi tikkoordina BIS-TRIS ma' joni tal-metall, l-istruttura tal-kumplessi tal-joni tal-metall tal-proteina tista' tiġi stabbilizzata, u tagħmilha aktar faċli li jintużaw tekniki bħall-kristallografija tar-raġġi X-u reżonanza manjetika nukleari (NMR) għall-analiżi strutturali.

Pereżempju, iċ-ċentri attivi ta' ċerti enzimi li fihom iż-żingu jeħtieġu joni taż-żingu biex iżommu l-attività katalitika tagħhom, u l-kumplessi BIS-TRIS Zn ² ⁺ jistgħu jipprovdu ambjent strutturali stabbli għal dawn l-enzimi, li jgħin biex janalizzaw b'mod preċiż l-istrutturi tridimensjonali tagħhom.

Fir-riċerka tal-aċidu nuklejku bħas-sekwenzjar tad-DNA, il-joni tal-metall jistgħu wkoll ikunu involuti fir-regolazzjoni tat-tiwi u funzjonali tal-aċidi nuklejċi. Il-koordinazzjoni bejn BIS-TRIS u joni tal-metall tista' tirregola l-ambjent lokali tal-aċidi nuklejċi, li taffettwa l-interazzjonijiet bejn aċidi nuklejċi u proteini, molekuli żgħar, eċċ., Li tipprovdi għodda b'saħħitha għal-riċerka fil-fond dwar l-istruttura u l-funzjoni tal-aċidi nuklejċi.

BIS-TRIS għandu applikazzjonijiet importanti fl-esperimenti tal-elettroforeżi tal-proteini. SDS-PAĠNA (elettroforeżi tal-ġel tal-polyacrylamide tas-sodju dodecyl sulfat) u PAĠNA Nattiva (elettroforeżi tal-ġell tal-polyacrylamide mhux denaturanti) huma tekniki komuni tal-elettroforeżi tal-proteini.BIS-TRIS bufferspiss jintuża biex jipprepara buffer tal-elettroforeżi biex iżżomm l-istabbiltà tal-pH tas-soluzzjoni waqt l-elettroforeżi.Fl-SDS-PAĠNA, il-proteini jiġu żnaturati u ċċarġjati b'mod negattiv f'buffer tal-kampjun li jkun fih SDS u mercaptoethanol, u mbagħad separati b'daqs molekulari f'ġel tal-polyacrylamide.

Jista 'jiżgura l-istabbiltà tal-valur tal-pH tal-buffer tal-elettroforeżi, li jippermetti li l-proteini jemigraw bil-mod mistenni f'kamp elettriku, u b'hekk jisseparaw b'mod preċiż proteini ta' piżijiet molekulari differenti u jiskopru l-piżijiet molekulari relattivi tagħhom.

Fil-PAĠNA Nattiva, il-proteini jżommu l-konformazzjoni naturali tagħhom għas-separazzjoni elettroforetika. L-użu tiegħu jista 'jipprevjeni d-denaturazzjoni tal-proteini minħabba bidliet fil-pH, jippreserva l-attività naturali u l-informazzjoni konformazzjonali tal-proteini, u jgħin biex jistudja l-istat naturali u l-interazzjonijiet tal-proteini.

Western blotting hija teknika sperimentali importanti użata biex tiskopri l-livell ta 'espressjoni ta' proteini fil-mira. Bis Tris propane buffer ħafna drabi jintuża bħala buffer tat-trasport tal-proteini f'esperimenti ta 'immunoblotting.

Matul it-trasferiment tal-proteina mill-ġel għall-membrana, il-buffer tal-propan Bis Tris jista 'jżomm ambjent stabbli tal-pH, u jiżgura li l-proteina tiġi trasferita għall-membrana b'konformazzjoni korretta u stat ta' ċarġ. Dan huwa kruċjali għall-irbit sussegwenti tal-antikorpi u l-iskoperta tas-sinjali.

Jekk il-proteini jgħaddu minn denaturazzjoni jew bidliet konformazzjonali matul il-proċess ta 'trasferiment, jista' jikkawża li l-antikorpi ma jkunux jistgħu jirrikonoxxu b'mod preċiż il-proteina fil-mira, u b'hekk jaffettwaw l-eżattezza tar-riżultati sperimentali. Għalhekk, il-buffer tal-propan Bis Tris għandu rwol kruċjali fl-esperimenti ta 'immunoblotting, u jgħin biex itejjeb is-sensittività u l-affidabbiltà tal-esperimenti.

Il-kultura taċ-ċelluli hija teknoloġija importanti fir-riċerka bijomedika, u l-valur tal-pH tal-mezz tal-kultura taċ-ċelluli għandu impatt sinifikanti fuq it-tkabbir taċ-ċelluli u l-metaboliżmu. BIS-TRIS propane buffer jista' jintuża għall-preparazzjoni tal-midja tal-kultura taċ-ċelluli biex jinżamm valur tal-pH stabbli matul il-proċess tal-kultura taċ-ċelluli.

Tipi differenti ta 'ċelluli għandhom rekwiżiti ta' pH li jvarjaw, iżda ġeneralment jeħtieġu tkabbir f'ambjent qrib il-pH fiżjoloġiku (madwar 7.2-7.4).

BIS-TRIS propane buffer jista 'jibferixxi l-bidliet fil-pH tal-medium tal-kultura waqt il-kultura taċ-ċelluli, jipprevjeni varjazzjonijiet fil-pH ikkawżati mill-akkumulazzjoni tal-prodott metaboliku, skambju tal-gass, u fatturi oħra, u jipprovdi ambjent ta' tkabbir stabbli għaċ-ċelloli. Dan huwa ta 'sinifikat kbir għat-tkabbir normali, il-proliferazzjoni, u l-espressjoni funzjonali taċ-ċelloli, li jgħin biex ittejjeb ir-rata ta' suċċess tal-kultura taċ-ċelluli u l-affidabbiltà tar-riżultati sperimentali.

L-elettroforeżi tal-aċidu nuklejku hija metodu użat b'mod komuni għall-iskoperta tat-tul u l-konċentrazzjoni tal-aċidi nuklejċi fil-mira, inkluż l-elettroforeżi tad-DNA u tal-RNA. Adattat għal esperimenti ta 'elettroforeżi ta' aċidu nuklejku, jista 'jżomm l-istabbiltà tal-pH tal-buffer ta' l-elettroforeżi.

Fl-elettroforesi tal-aċidu nuklejku, il-molekuli tal-aċidu nuklejku jemigraw taħt l-azzjoni ta 'kamp elettriku abbażi tad-daqs u l-proprjetajiet tal-iċċarġjar tagħhom.

Jista 'jiżgura l-istabbiltà tal-valur tal-pH tas-soluzzjoni waqt l-elettroforeżi, li jippermetti li l-molekuli tal-aċidu nuklejku jemigraw bil-mod mistenni, u b'hekk jisseparaw b'mod preċiż frammenti tal-aċidu nuklejku ta' tulijiet differenti u jiskopru l-konċentrazzjonijiet tagħhom. Dan huwa ta 'sinifikat kbir għar-riċerka bħall-klonazzjoni tal-ġeni, l-analiżi tal-espressjoni tal-ġeni u s-sekwenzjar tal-aċidu nuklejku.

BIS-TRIS jista' jintuża wkoll biex jiskopri creatine kinase. Creatine kinase hija enzima importanti li għandha rwol kruċjali fil-metaboliżmu tal-enerġija tal-muskoli. Id-determinazzjoni tal-attività tagħha hija ta 'sinifikat kbir għad-dijanjosi tal-mard tal-muskoli u l-evalwazzjoni ta' korrimenti sportivi. Fl-esperiment ta 'sejbien ta' creatine kinase, l-istabbiltà tal-pH tas-sistema ta 'reazzjoni tista' tinżamm biex jiġi żgurat li l-enzima turi attività katalitika taħt kundizzjonijiet ta 'pH ottimali. Billi tikkontrolla b'mod preċiż il-valur tal-pH, l-eżattezza u l-affidabbiltà tal-kejl tal-attività tal-creatine kinase jistgħu jittejbu, u jipprovdu appoġġ qawwi għad-dijanjosi klinika u r-riċerka.

BIS-TRIS għandu wkoll rwol importanti fir-riċerka u l-applikazzjoni tal-emoglobina. Matul il-proċess ta 'separazzjoni tal-emoglobina, l-istabbiltà u l-attività tagħha jistgħu jinżammu biex jipprevjenu d-denaturazzjoni jew l-aggregazzjoni minħabba bidliet fil-pH. Dan huwa ta 'sinifikat kbir għall-purifikazzjoni u r-riċerka strutturali tal-emoglobina.

BIS-TRIS jista' jipproteġi b'mod effettiv l-emoglobina waqt il-proċess ta' tnixxif bil-friża-. It-tnixxif bil-friża huwa metodu użat komunement għall-preservazzjoni tal-prodotti bijoloġiċi, iżda l-proteini jistgħu jiġu mħassra matul il-proċess tal-iffriżar u t-tnixxif. Jista 'jipprovdi ambjent stabbli għall-emoglobina matul il-proċess tat-tnixxif tal-iffriżar-, inaqqas id-denaturazzjoni u l-inattivazzjoni tal-proteini, u jtejjeb l-attività u l-istabbiltà tal-emoglobina wara t-tnixxif tal-iffriżar-.

L-IEF (elettroforeżi li tiffoka isoelettrika) u l-elettroforeżi tal-ġel 2-D huma tekniki komuni fir-riċerka tal-proteomika, li jintużaw biex jisseparaw u janalizzaw taħlitiet kumplessi ta 'proteini. BIS-TRIS jista 'jintuża bħala elettrolit katodu għall-elettroforesi tal-ġel IEF/2-D.

Matul il-proċess IEF, il-proteini jemigraw u jiffokaw fi gradjent tal-pH ibbażat fuq il-punt iżoelettriku tagħhom. BIS-TRIS catholyte jista 'jżomm l-istabbiltà tal-pH tal-buffer tal-elettroforeżi, u jiżgura li l-proteini jistgħu jemigraw b'mod preċiż lejn il-punt iżoelettriku tagħhom matul il-proċess ta' fokus iżoelettriku. Fl-elettroforesi tal-ġel 2-D, l-użu ta 'BIS-TRIS bufferjgħin ukoll biex itejjeb l-effett ta' separazzjoni u r-riżoluzzjoni tal-proteini, billi jipprovdi dejta ta'-kwalità għolja għar-riċerka dwar il-proteomika.