4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucuronide CAS 6160-80-1

4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucuronide(4-MUG) huwa kompost organiku bil-formula molekulari C16H13NO7 u massa molari ta' 333.27 g/mol għal CAS 6160-80-1. Normalment jidher bħala trab jew kristall abjad għal isfar ċar. Għandu solubilità tajba fl-ilma u jista 'jinħall fl-ilma. L-istruttura molekulari ta' dan il-kompost fiha grupp ta' aċidu glukuroniku (GlcA) u grupp 4-methylumbelliferone (4-MeUmb). Il-grupp ta' l-aċidu glukuronic huwa konness mal-grupp 4-methylumbelliferone permezz ta' rabtiet glycosidic. Proprjetajiet spettrali karatteristiċi. Pereżempju, taħt dawl ultravjola, il-kompost juri fluworexxenza qawwija u jista 'jintuża għall-analiżi kwantitattiva tiegħu. It-tul ta 'mewġ massimu ta' eċċitazzjoni tiegħu u t-tul ta 'mewġ massimu ta' emissjoni huma 365nm u 448nm, rispettivament. Huwa aċidu dgħajjef b'valur pKa aktar baxx fl-ilma. Bħala sottostrat bi proprjetajiet fluworexxenti, għandu valur ta 'applikazzjoni wiesa' fl-iskoperta u l-iskrinjar tal-attività tal-enżimi. Il-prinċipju sempliċi, it-tħaddim konvenjenti, is-sensittività għolja u l-kwantifikabbiltà tiegħu jagħmluha għodda importanti f'diversi oqsma bħax-xjenzi bijomediċi, kimiċi u bijoloġiċi.

4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucuronide(4-MUG) huwa substrat fluworexxenti użat ħafna għall-iskoperta u l-iskrinjar tal-attività tal-enżimi.

1. Sejbien ta 'attività ta' enzima

Prinċipju: Is-sejbien tal-attività tal-enżimi ta' 4-MUG huwa bbażat fuq il-karatteristika tiegħu li jiġi idrolizzat minn enzimi speċifiċi bħala sottostrat. Meta l-enzima taġixxi fuq 4-MUG, hija xxekkel ir-rabtiet glikosidiċi tagħha, u tirrilaxxa 4-methylumbelliferone (4-MU) bi proprjetajiet fluworexxenti. Billi tiskopri l-intensità u l-bidliet tas-sinjali tal-fluworexxenza, l-attività tal-enzimi tista 'tiġi evalwata.

Qasam ta' applikazzjoni:

(1) Analiżi tal-kampjun bijoloġiku: Bl-użu ta '4-MUG bħala sottostrat, tista' tiġi skoperta l-attività ta 'enzimi speċifiċi f'kampjuni bijoloġiċi (bħal demm, awrina, omoġenat tat-tessut, eċċ.). Dan huwa ta 'sinifikat kbir għad-dijanjosi tal-mard, ir-riċerka dwar il-metaboliżmu tad-droga, u l-iskoperta tal-bijomarkaturi.

(2) Screening tal-inibituri tal-enżimi: Permezz tal-koinkubazzjoni 4-MUG b'inibituri tal-enżimi, jista 'jiġi osservat l-effett tal-inibituri tal-enżimi fuq l-attività tal-enżimi. Dan il-metodu jista 'jintuża biex jeżamina u jevalwa l-effikaċja tal-inibituri tal-enżimi, li jipprovdi gwida għad-disinn u l-iżvilupp tad-droga.

(3) Riċerka tal-kinetika tal-enżimi: Bl-użu ta 'konċentrazzjonijiet differenti ta' 4-MUG bħala substrati, jistgħu jiġu studjati l-parametri kinetiċi tal-enzima, bħall-kostanti Michaelis (Km) u r-rata massima ta 'reazzjoni (Vmax). Din id-dejta tgħin biex tifhem il-mekkaniżmu u l-effiċjenza tar-reazzjonijiet katalizzati bl-enzimi.

2. Screening tal-attività tal-enzimi

(1) Skrinjar ta' throughput għoli: 4-MUG huwa adattat għall-iskrinjar ta 'attività ta' enzima b'rendiment għoli minħabba li għandu proprjetajiet ta 'fluworexxenza u jista' jikseb skoperta rapida u sensittiva. Permezz tal-koinkubazzjoni ta' numru kbir ta' komposti kandidati b'4-MUG, il-komposti b'regolazzjoni tal-attività tal-enżimi jistgħu jiġu skrinjati.

(2) Skrinjar tal-inibituri tal-enżimi: Billi tuża 4-MUG bħala sottostrat, il-komposti b'effetti inibitorji tal-enżimi jistgħu jiġu skrinjati. Dan il-metodu jista 'jintuża biex jiskopru inibituri ta' enżimi ġodda u jipprovdi molekuli kandidati għad-disinn u l-iżvilupp tad-droga.

(3) Skrinjar tal-attivaturi tal-enżimi: Minbarra l-inibituri tal-enżimi, 4-MUG jista 'jintuża wkoll għall-iskrinjar ta' komposti b'effetti tal-attivazzjoni tal-enżimi. Billi tiskopri t-titjib tas-sinjali tal-fluworexxenza, jistgħu jiġu identifikati komposti li jistgħu jtejbu l-attività tal-enzimi, li jipprovdu mogħdijiet ġodda għar-regolazzjoni tal-funzjoni tal-enżimi.

3. Tikkettar tal-bijofluworexxenza: 4-Methyllumbelliferol-beta-D-glucuronide għandu proprjetajiet ta 'fluworexxenza u spiss jintuża bħala markatur tal-bijofluworexxenza. Jista 'jarmi fluworexxenza blu qawwi taħt l-eċitazzjoni tad-dawl ultravjola, u l-ispettru tal-emissjoni jikkoinċidi b'mod sinifikanti mal-ispettru tal-eċitazzjoni, li huwa ta' benefiċċju għall-iskoperta u l-analiżi tal-fluworexxenza. Sondi fluworexxenti jistgħu jsiru billi jorbtu 4-Methyllumbelliferol-beta-D-glucuronide ma 'antikorpi, proteini, jew bijomolekuli oħra, li jistgħu jintużaw għal skoperta sensittiva u lokalizzazzjoni ta' molekuli fil-mira f'kampjuni bijoloġiċi.

4. Riċerka dwar il-metaboliżmu tad-droga:4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucuronidespiss jintuża bħala kompost mudell għar-riċerka dwar il-metaboliżmu tad-droga. Fir-riċerka dwar il-metaboliżmu tad-droga, dan il-kompost jista 'jissimula l-istruttura tal-metaboliti naturali u jservi bħala mudell għall-prodotti intermedji jew finali possibbli li jistgħu jiġu prodotti waqt il-metaboliżmu tad-droga. Billi nistudjaw u nikkaratterizzaw il-proċessi metaboliċi tad-drogi fl-organiżmi, nistgħu niksbu għarfien aktar profond tal-mogħdijiet metaboliċi, il-kinetika u l-bijodisponibilità tagħhom.

Il-metodu ta 'sintesi tal-laboratorju ta'4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucuronidejinkludi l-passi li ġejjin:

(1) Introduzzjoni ta 'gruppi protettivi: Agħżel gruppi protettivi xierqa biex tipproteġi l-aċidu glukuronic u tevita reazzjonijiet sekondarji mhux meħtieġa f'reazzjonijiet sussegwenti. Gruppi protettivi komuni jinkludu gruppi ester, gruppi etere, eċċ. Agħżel ester tal-metil bħala l-grupp protettiv biex jikkonverti l-aċidu glukuroniku f'aċidu glukuroniku tal-ester tal-metil. Din ir-reazzjoni tuża metanol u carboxylic anhydride bħala reactants, bl-aċidu sulfuriku bħala l-katalist.

L-ekwazzjoni tar-reazzjoni hija kif ġej:

(CH₃)₂C(OH)-CH₂-COOH + H₂HEKK₄→ (CH₃)₂C(O)-CH₂-COOH + CH₃OH

(2) Reazzjoni ta 'akkoppjar: Reazzjoni ta' akkoppjar bejn 4-methylumbelliferone u aċidu glukuroniku bi gruppi protettivi. Dan il-pass ġeneralment jeħtieġ l-użu ta 'aġenti ta' akkoppjar bħal DCC, EDC, eċċ biex jiffaċilitaw ir-reazzjoni. Il-kundizzjonijiet tar-reazzjoni jeħtieġ li jiġu kkontrollati b'mod xieraq biex jiżguraw il-purità u r-rendiment tal-prodott. Din ir-reazzjoni tuża DCC bħala aġent ta' akkoppjar,

(3) L-ekwazzjoni tar-reazzjoni hija kif ġej:

(CH₃)₂C(O)-CH₂-COOH + NH₂-CH=CH-COOH + DCC + C₆H₅N₃O → (CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-COOH + H₂O + NH₄OH

(CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-COOH + NH₂(CH₃) → (CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-CO-NH(CH₃) + H₂O

(CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-CO-NH(CH₃) + HBr → (CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-CO-Br(CH₃) + HBr

(CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-CO-Br(CH₃) → (CH₃)₂C(O)-CH₂-CO[C₁₆H₈-(NH^-)-6]-Br(CH₃) + NaCl + NaBr

(3) Tneħħija ta 'gruppi protettivi: Billi tuża taħlita ta' metanol tas-sodju u etanol tas-sodju bħala katalizzatur, l-ester tal-metil tal-aċidu metil glukuronic jitneħħa minn 4-Methyllumbelliferyl beta D-glucuronide. L-ekwazzjoni tar-reazzjoni hija kif ġej:

(CH₃)₂C(O)-CH₂-CO[C₁₆H₈-(NH^-)-6]-Br(CH₃) + CH₃ONa + C₂H₅ONa → (CH₃)₂C(O)-CH₂-CO[C₁₆H₈-(NH^-)-6] + 2NaBr + 2CH₃OH + C₂H₅OH

(4) Purifikazzjoni: Il-prodott mhux raffinat huwa ppurifikat permezz ta 'kromatografija tal-kolonna u rikristallizzazzjoni biex jinkiseb 4-Methyllumbelliferol-beta-D-glucuronide ta' purità għolja. Il-proċess speċifiku huwa kif ġej:

Dewweb il-prodott mhux raffinat f'ammont xieraq ta' solvent u sseparah bil-kromatografija tal-kolonna. Agħżel l-assorbenti u l-eluwenti xierqa, aħsel l-impuritajiet u l-materja prima mhux reazzjoni f'sekwenza biex tikseb prodotti puri. Ir-rikristallizzazzjoni hija l-proċess li tħoll prodotti puri f'ammont xieraq ta 'solvent u tikseb prodotti puri bit-tkessiħ u l-kristallizzazzjoni. Ir-rikristallizzazzjoni tista 'tneħħi ammont żgħir ta' materja prima u prodotti sekondarji li ma rreaġixxewx, u tkompli ttejjeb il-purità tal-prodott.

It-tags Popolari: 4-methylumbelliferyl-beta-d-glucuronide cas 6160-80-1, fornituri, manifatturi, fabbrika, bl-ingrossa, jixtru, prezz, bl-ingrossa, għall-bejgħ