Liraglutide Powder CAS 204656-20-2

Trab tal-liraglutide, Formula Molekulari C172H265N43O51, CAS 204656-20-2, piż molekulari 1209.40. Huwa glucagon aċilat uman aċilat artifiċjalment bħal peptide-1 (GLP-1) analogu b'aktar minn 97% xebh tas-sekwenza meta mqabbel ma 'GLP-1 naturali. Jista 'jinħall fl-ilma, l-etanol, u l-propilene glycol. L-34 pożizzjoni tal-lisina tal-molekula naturali GLP-1 hija sostitwita minn arginine, li mhux biss tippreserva u ttawwal il-ħin li jorbot bejn il-prodotti ta 'l-aċilazzjoni u l-proteini, iżda wkoll tegħleb b'mod sinifikanti l-iżvantaġġ ta' degradazzjoni faċli ta 'GLP. Taħt kundizzjonijiet ta 'ħażna normali, hija turi stabbiltà tajba, u s-soluzzjoni milwiema tagħha tista' żżomm stabbiltà fiżika u kimika għal mill-inqas sentejn.

Tossiċità ġenetika: ir-riżultati tat-test Ames għalTrab tal-liraglutide, it-test tal-aberrazzjoni kromożomika għal-limfoċiti tad-demm periferali uman, u t-test tal-mikronukleu tal-far kienu kollha negattivi.

Tossiċità riproduttiva:

1. Il-firien maskili ġew injettati taħt il-ġilda b'0.1, 0.25, u 1.0mg / kg / d ta 'liraglutide 4 ġimgħat qabel it-tgħammir u waqt it-tgħammir. F'doża ta '1.0mg / kg / d, il-fertilità tal-annimali maskili ma ġietx affettwata direttament. Skond il-kalkoli tal-AUC fil-plażma, l-esponiment sistemiku ġġenerat minn din id-doża kien ta 'madwar 11-il darba dik ta' esponiment tal-bniedem fid-doża massima rakkomandata umana (MRHD). Injezzjoni taħt il-ġilda ta '1.0mg / kg fil-firien nisa rriżultat f'żieda fil-mewt tal-embrijoni bikrija, żieda fil-piż viżibbli, u tnaqqis fil-konsum tal-ikel.

2 Skond il-kalkoli tal-AUC fil-plażma, l-esponiment sistemiku ġġenerat minn dawn it-tliet dożi kien bejn wieħed u ieħor 0.8, 3, u 11-il darba dak ta 'espożizzjoni umana taħt MRHD, rispettivament. Fil-grupp tad-doża ta '1mg / kg / d, kien hemm żieda żgħira fl-għadd ta' mwiet bikrija tal-embrijoni. Fid-dożi kollha, anormalitajiet tal-fetu, varjazzjonijiet tal-kliewi u vaskulari, ossifikazzjoni irregolari tal-kranju, u stat komplet ta 'ossifikazzjoni eċċessiva ġew osservati. F'doża ta '1.0mg / kg / d, ġew osservati fwied imnebbaħ u brim ħafif tal-kustilja. L-inċidenza ta 'malformazzjonijiet tal-fetu li jaqbżu l-istess perjodu u l-kontroll storiku hija: malformazzjonijiet orofaringeali u / jew stenosi fil-ftuħ tal-gerżuma f'doża ta' 01mg / kg / d, u difetti umbilikali f'dożi ta '0.1 u 0.25mg / kg / d.

Fis-6 sat-18-il jum tat-tqala, il-fniek ġew injettati taħt il-ġilda b'liraglutide f'konċentrazzjonijiet ta '0.01, 0.025, u 0.05mg / kg / d. Skond il-kalkoli tal-AUC fil-plażma, l-esponiment sistemiku tal-fniek tqal kienet inqas minn dik tal-bnedmin waqt l-MRHD. Fid-dożi kollha, il-piż tal-fetu naqas u l-inċidenza ġenerali ta 'anormalitajiet severi tal-fetu żdiedet b'mod dipendenti mid-doża. F'dożi ta '0.01mg / kg / d (għadam tal-kliewi, l-ispalla u tal-milsa), akbar minn jew daqs 0.01mg / kg / d (għajnejn u forelimbs), 0.025mg / kg / d (moħħ, denb u vertebra, vertebrae, vini tad-demm kbar u qalb, qalba, aktar minn 0.025mg / kg / d (sternum) u 0.05mg / kg / d (għadam parietali u vini kbar tad-demm), l-inċidenza ta 'malformazzjonijiet qabżet dik tal-kontrolli kontemporanji u storiċi. Ossifikazzjoni irregolari u / jew anormalitajiet skeletriċi jinstabu fil-kranju u l-għonq, vertebri u kustilji, sternum, pelvi, coccyx, u għadam ta 'l-ispalla u tal-milsa; Hemm ukoll varjazzjoni skeletrika żgħira dipendenti fuq id-doża viżibbli. Anormalitajiet viscerali jinstabu f'bastimenti tad-demm, pulmuni, fwied, u esofagu. Il-gruppi ta 'trattament kollha wrew lobi doppji jew bifurcations tal-marrara, iżda ma ġiet osservata l-ebda sitwazzjoni simili fil-grupp ta' kontroll.

4 Skond il-kalkoli tal-AUC fil-plażma, l-esponiment sistemiku kien bejn wieħed u ieħor 0.8, 3, u 11-il darba dak ta 'esponiment tal-bniedem waqt l-MRHD. Il-perjodu ta 'konsenja ta' ħafna annimali fil-grupp ta 'trattament kien kemmxejn imdewwem. Il-piż medju tat-trabi tat-twelid fil-grupp ta 'trattament kien inqas minn dak fil-grupp ta' kontroll. Il-firien nisa fil-grupp ta 'doża ta' 1.0mg / kg / d urew imġieba ta 'telf ta' demm u eċċitament waqt il-kunsinna. Il-piż medju tal-ġisem tal-firien tal-frieħ F2 fil-grupp ta 'trattament mit-twelid sal-14-il jum wara t-twelid kien inqas minn dak tal-grupp ta' kontroll, iżda d-differenzi bejn il-gruppi ma laħqux sinifikat statistiku.

Trab tal-liraglutidehuwa glucagon aċilat uman aċilat artifiċjalment bħal peptide-1 (GLP-1) analogu b'aktar minn 97% xebh tas-sekwenza meta mqabbel ma 'GLP-1 naturali. L-istruttura molekulari ta 'liraglutide tinkludi l-karatteristiċi ewlenin li ġejjin: il-34 pożizzjoni tal-lysine tal-molekula naturali GLP-1 hija sostitwita minn arginine, li mhux biss tippreserva u ttawwal il-ħin li jorbot bejn il-prodotti ta' l-aċilazzjoni u l-proteini, iżda wkoll tegħleb b'mod sinifikanti l-iżvantaġġ tad-degradazzjoni faċli ta 'GLP; Ġiet miżjuda katina addizzjonali tal-ġenb ta 'l-aċidu xaħmi li kienet miżjuda mas-26 lysine, li tgħin biex tittawwal il-half-life ta' prodotti ta 'l-aċilazzjoni in vivo. Dawn il-bidliet molekulari uniċi għamlu Delilaglutide juru effetti pendenti fit-trattament kliniku, speċjalment fid-dijabete u telf ta 'piż.

Il-metodi kimiċi għas-sintetizzazzjoni tal-liraglutide jinkludu prinċipalment il-passi li ġejjin:

1. Sintesi ta 'framment

L-ewwelnett, aqsam il-liraglutide kollu f'diversi segmenti, li ġeneralment jistgħu jinqasmu f'ħames segmenti: 1 sa 4 aċidi amminiċi, 5 sa 10 aċidi amminiċi, 11 sa 16-il aċidi amminiċi, 17 sa 24 aċidi amminiċi, u 25 sa 31 aċidi amminiċi. Kull framment huwa sintetizzat separatament, li jista 'jnaqqas id-diffikultà u l-ispiża tas-sinteżi tal-peptidi u jtejjeb l-effiċjenza tas-sinteżi.

Għas-sintesi ta 'kull framment, sinteżi ta' fażi solida jew metodi ta 'sinteżi ta' fażi likwida huma ġeneralment użati. Il-metodu ta 'sinteżi ta' fażi solida jinvolvi l-konnessjoni tal-gruppi karbossiliċi ta 'aċidi amminiċi mar-reżina, imbagħad iżżid b'mod sekwenzjali l-aċidi amminiċi mar-reżina f'sekwenza, u finalment taqta' l-peptidi mir-reżina. Il-metodu ta 'sinteżi tal-fażi likwida jinvolvi li jinħall l-aċidi amminiċi kollha f'solvent organiku u mbagħad jikkondensahom f'sekwenza biex jiffurmaw frammenti ta' peptidi.

2. Reazzjoni ta 'l-akkoppjar

Wettaq reazzjoni ta 'akkoppjar fuq il-5 frammenti ta' peptidi sintetizzati fil-pass 1 biex tifforma liraglutide komplet. Ir-reazzjoni ta 'l-akkoppjar tista' titwettaq bl-użu ta 'aġenti ta' akkoppjar kimiku jew bijoloġiku, u l-metodu speċifiku jista 'jintgħażel skond il-bżonnijiet attwali.

Fir-reazzjoni tal-akkoppjar, huwa meħtieġ li l-grupp amino jgħaqqad kull framment mal-grupp carboxyl tal-framment li jmiss. Biex jinkiseb dan, ġeneralment ikun meħtieġ li jintużaw aġenti tal-kondensazzjoni bħal DIC jew BOP. Dawn l-aġenti tal-kondensazzjoni jistgħu jippromwovu r-reazzjoni bejn gruppi amminiċi u karbossiliċi, li jiffurmaw bonds peptidi. Fir-reazzjoni ta 'l-akkoppjar, għandha tingħata wkoll attenzjoni lill-kontroll tal-kundizzjonijiet ta' reazzjoni, bħat-temperatura, il-valur tal-pH, u l-ħin ta 'reazzjoni, biex jiġi żgurat il-progress bla xkiel tar-reazzjoni.

3. Purifikazzjoni u identifikazzjoni

Il-liraglutide sintetizzata jeħtieġ li tiġi ppurifikata u identifikata biex tiżgura l-purità u l-kwalità tal-prodott. Il-purifikazzjoni ġeneralment titwettaq bl-użu ta 'metodi bħal kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC) jew elettroforeżi, segwita minn identifikazzjoni bl-użu ta 'spettrometrija tal-massa, reżonanza manjetika nukleari, u metodi oħra. Permezz ta 'dawn il-mezzi, jista' jkun assigurat li l-piż molekulari u s-sekwenza tal-prodott sintetizzat ikunu konsistenti mal-aspettattivi, u m'hemm l-ebda impuritajiet jew residwi ta 'prodott sekondarju.

4. Modifiki oħra

Minbarra l-passi ta 'hawn fuq, xi kultant huma meħtieġa modifiki oħra, bħal żieda jew tneħħija ta' gruppi protettivi. Dawn il-passi huma wkoll essenzjali peress li jistgħu jipproteġu l-gruppi attivi fil-peptidi milli jinqerdu jew iseħħu reazzjonijiet sekondarji, li jtejbu l-kwalità u r-rendiment ta 'sintetizzatiTrab tal-liraglutide.

Hawn fuq huma l-metodi kimiċi ewlenin għas-sintetizzazzjoni tal-liraglutide, iżda ovvjament, xi dettalji u tekniki jeħtieġ li jiġu nnotati f'operazzjoni prattika. Pereżempju, l-għażla tas-sistema tas-solvent xierqa, il-kontroll tat-temperatura u l-pH, u l-użu ta 'katalizzaturi xierqa jistgħu kollha jaffettwaw l-effiċjenza tas-sinteżi u l-kwalità tal-prodott. Għalhekk, fl-operazzjoni prattika, l-aġġustamenti u l-ottimizzazzjonijiet jeħtieġ li jsiru skond ċirkostanzi speċifiċi.

Liraglutide (agonist tar-riċettur GLP-1 li jaġixxi fit-tul) għandu rwol sinifikanti fit-trattament tad-dijabete. Biex tkun żgurata l-kontrollabbiltà tal-kwalità tagħha, huwa meħtieġ li jiġu stabbiliti metodi analitiċi xjentifiċi u rigorużi, u twettaq validazzjoni sistematika biex tiżgura l-affidabbiltà ta 'dawn il-metodi. L-analiżi li ġejja titwettaq minn tliet aspetti: oġġetti ta 'validazzjoni, metodi ta' validazzjoni, u punti ta 'kontroll ewlenin.

Oġġetti tal-verifika tal-qalba u rekwiżiti tekniċi

Speċifiċità

Objettiv: Li tipprova li l-metodu jista 'jiddistingwi liraglutide minn impuritajiet, prodotti ta' degradazzjoni, u eċċipjenti.

Strateġija ta 'Implimentazzjoni:

Kromatografija: Uża HPLC-UV jew UPLC-MS. Permezz ta 'testijiet ta' degradazzjoni sfurzata (bħal temperatura għolja, esponiment għad-dawl, idroliżi ta 'aċidu-bażi), tiġġenera prodotti ta' degradazzjoni u tivverifika l-grad ta 'separazzjoni tal-quċċata ewlenija u l-quċċata ta' impurità (akbar minn jew daqs 1.5). Pereżempju, fl-istudju tal-mudell apoE - / - ġurdien, wara li l-liraglutide huwa ossidizzat, il-prodotti ta 'degradazzjoni (bħal adducts ta' aċidu formiku) jeħtieġ li jiġu kkonfermati minn analiżi kromatografika biex jiġi żgurat l-effett ta 'separazzjoni tal-prodotti ta' degradazzjoni mill-quċċata ewlenija.

Spettroskopija: Uża ditekter PDA biex tqabbel l-ispettri UV tal-quċċata u l-impuritajiet ewlenin, u tikkonferma l-purità tal-qċaċet.

Kontroll vojt: Ivverifika n-nuqqas ta 'sinjali pożittivi foloz billi tuża kampjuni mingħajr liraglutide (bħal soluzzjonijiet eċċitanti).

 

Eżattezza

Objettiv: Li jiġi żgurat li r-riżultati mkejla jkunu qrib il-valur veru u r-rata ta 'rkupru tkun ikkontrollata fi ħdan 98% - 102%.

Strateġija ta 'Implimentazzjoni:

Test ta 'rkupru ta' żieda standard: Żid ammont magħruf ta 'sustanza ta' referenza ma 'kampjun b'kontenut ta' liraglutide magħruf u kejjel ir-rata ta 'rkupru. Pereżempju, fl-analiżi tal-formulazzjoni, żid 0.5 mg / ml, 1.0 mg / ml, u 1.5 mg / ml ta 'liraglutide mas-soluzzjoni ta' eċċipjent vojt, irrepeti kull konċentrazzjoni 3 darbiet, u kkalkula r-rata medja ta 'rkupru.

Metodu ta 'Tqabbil: Qabbel ma' metodi klassiċi (bħal titrazzjoni) jew metodi vverifikati (bħal metodi ta 'farmakopea), u d-devjazzjoni tar-riżultat għandha tkun inqas minn jew daqs 2%.

 

Preċiżjoni

Objettiv: Li tevalwa l-grad ta 'qrubija tar-riżultati tal-kejl ripetuti, b'RSD inqas minn jew daqs 2%.

Strateġija ta 'Implimentazzjoni:

Ripetibbiltà: Wettaq 6 kejl konsekuttiv tal-istess kampjun mill-istess analista, l-istess strument, u l-istess lott ta 'kampjuni, u kkalkula l-RSD.

Preċiżjoni intermedja: Ikkalkula l-RSD billi tiddetermina l-istess lott ta 'kampjuni minn analisti differenti, strumenti differenti, u dati differenti. Pereżempju, fid-determinazzjoni tal-kontenut ta 'liraglutide, ir-ripetibilità RSD għandha tkun inqas minn jew daqs 1.5%, u l-RSD ta' preċiżjoni intermedja għandha tkun inqas minn jew daqs 2.0%.

Riproduċibilità: Verifika kollaborattiva minn laboratorji multipli (bħal metodi standard tal-farmakopea), l-RSD għandha tikkonforma mal-prinċipji ta 'gwida.

 

Limitu ta 'skoperta u limitu ta' kwantifikazzjoni

Objettiv: Li tiddetermina l-konċentrazzjoni minima li l-metodu jista 'jikxef u jikkwantifika l-liraglutide.

Strateġija ta 'Implimentazzjoni:

Metodu ta 'proporzjon sinjal-ħoss: Iddetermina l-LOD bi proporzjon sinjal 3: 1, u ddetermina LOQ bi proporzjon sinjal 10: 1. Pereżempju, fil-metodu HPLC-UV, il-LOD ta 'liraglutide jista' jkun baxx daqs 0.01 ug / ml, u l-LOQ huwa 0.05 ug / ml.

Metodu tal-Kurva Standard: Ikkalkula LOD u LOQ billi tuża s-sinjali ta 'rispons ta' sustanzi standard ta 'konċentrazzjoni baxxa (bħal 0.1 ug / ml - 1 ug / ml).

 

Linearità

Objettiv: Li tipprova li s-sinjal tar-rispons huwa proporzjonali għall-konċentrazzjoni, b'R² akbar minn jew daqs 0.999.

Strateġija ta 'Implimentazzjoni:

Test tal-Konċentrazzjoni tal-Gradjent: Ipprepara 5-7 gradjenti tal-konċentrazzjoni (bħal 0.1 mg / ml - 2.0 mg / ml) ta 'soluzzjonijiet standard, kejjel iż-żona tal-quċċata jew il-valur tar-rispons, u iġbed il-kurva standard.

Analiżi residwa: Iċċekkja jekk ir-residwi humiex imqassma bl-addoċċ u m'hemm l-ebda devjazzjoni sistematika.

 

Firxa

Objettiv: Li tiddetermina l-firxa ta 'konċentrazzjoni applikabbli tal-metodu, ġeneralment 120% tal-LOQ sal-limitu ta' fuq tal-linearità.

Strateġija ta 'Implimentazzjoni:

Determinazzjoni tal-Kontenut: Il-firxa hija stabbilita għal 80% - 120% tal-ammont ittikkettjat. Pereżempju, il-firxa tad-determinazzjoni tal-kontenut tal-formulazzjoni tal-liraglutide għandha tkun 0.4 mg / ml - 1.2 mg / ml. Kontroll tal-impurità: Skond il-linja gwida ICH Q3D, issettja l-firxa tal-limitu ta 'impuritajiet (eż., Impurità waħda inqas minn jew daqs 0.5%, impurità totali inqas minn jew daqs 2.0%).

Dokumenti ta 'Validazzjoni u Ġestjoni tad-Dejta

01

Pjan u rapport ta 'validazzjoni

Iddefinixxi b'mod ċar l-oġġetti ta 'validazzjoni, metodi, standards ta' aċċettazzjoni, u proċeduri ta 'immaniġġjar anormali. Pereżempju, jekk l-RSD ta 'preċiżjoni taqbeż il-limitu, huwa meħtieġ li jiġu investigati ħsarat fl-istrumenti jew żbalji operattivi.

Irreġistra d-dejta oriġinali (bħal kromatogrammi, kurvi standard, tabelli ta 'kalkolu tar-rata ta' rkupru) biex tiżgura traċċabilità.

02

Żvilupp tal-metodu tal-indikazzjoni tal-istabbiltà

Għal testijiet ta 'degradazzjoni obbligatorja, għandha tkopri l-ossidazzjoni, esponiment ħafif, idroliżi, eċċ., Biex tissimula kundizzjonijiet ta' ħażna attwali. Pereżempju, liraglutide tqiegħed f'60 grad għal 48 siegħa, ir-rata ta 'degradazzjoni għandha tkun ikbar minn jew daqs 10% biex tivverifika l-abilità tal-metodu li tiskopri prodotti ta' degradazzjoni.

03

Konformità regolatorja

Segwi ICH Q2 (R2), USP<1225>, u l-linji gwida Ċiniżi tal-GMP biex jiżguraw li l-oġġetti ta 'validazzjoni jkopru indikaturi tal-qalba bħall-ispeċifiċità u l-eżattezza.

Għall-analiżi tal-impurità elementali, għandha tikkonforma ma 'ICH Q3D u USP<233>Ir-rekwiżiti, li jikkontrollaw il-limiti ta 'elementi ta' 1 klassi bħal, CD, u Pb.

It-tags Popolari: Liraglutide Powder CAS 204656-20-2, fornituri, manifatturi, fabbrika, bl-ingrossa, jixtru, prezz, bl-ingrossa, għall-bejgħ