Trab tal-agarosehija sustanza organika bil-formula kimika c24h38o19. Hija xoffa bajda jew isfar bħal partiċelli tal-ġel jew trab, li hija polimeru lineari, u l-istruttura bażika hija 1,3 linked - D-galactose u 1,4-linked 3,6-endoether-l-galactose huma marbuta alternattivament.
Agar pectin hija taħlita eteroġenja magħmula minn ħafna molekuli iżgħar. L-agarose ġeneralment jissaħħan għal aktar minn 90 grad biex jinħall fl-ilma, u meta t-temperatura tinżel għal 35-40 grad, tifforma ġel semi-solidu tajjeb, li hija l-karatteristika ewlenija u l-bażi tal-użi varji tagħha. Il-prestazzjoni tal-ġel agarose hija ġeneralment espressa mill-qawwa tal-ġel. Aktar ma tkun għolja s-saħħa, aħjar tkun il-prestazzjoni tal-ġell.
Trab tal-agarosehuwa derivat mill-polisakkaridi tal-alka ħamra, u l-komponent ewlieni tiegħu huwa l-aktar lactose, li madwar 70% huwa agarose u 30% huwa agarose b'katina ramifikata.
Agarose għandu struttura lineari, b'unitajiet disaccharide ripetuti ffurmati alternattivament minn D-galactose u 3,6-galactose beta-1,4 u alpha-1,3.
Estratt agarose ramifikat minn -1, bi tliet bonds li jisseparaw katina oħra. Is-sustanza estratta mill-alka bil-misħun fiha madwar 40% agar.
L-agar kummerċjali (ġeneralment imsejjaħ agar) huwa ġeneralment fil-forma ta 'folji rqaq jew ħbula maħlula u huwa komunement użat bħala chewing gum li jittiekel, aġent tal-ippakkjar tad-droga, jew mezz ta' kultura batterjali.
L-agarose pur spiss jintuża bħala appoġġ semi-solidu f'laboratorji bijokimiċi, għall-elettroforeżi, kromatografija, u tekniki oħra, għas-separazzjoni u l-analiżi ta' bijomolekuli jew molekuli żgħar.
Trab tal-Agarosehuwa polysaccharide estratt mill-alka tal-baħar u huwa l-komponent ewlieni tal-agar. Mill-iskoperta tiegħu, intuża ħafna f'ħafna oqsma minħabba l-proprjetajiet fiżiċi u kimiċi uniċi tiegħu, bħall-kapaċità li tifforma l-ġel, l-istabbiltà termali, l-istabbiltà kimika u l-bijokompatibilità. Din li ġejja hija spjegazzjoni dettaljata tal-iskop tagħha:
Applikazzjoni fir-Riċerka Bijomedika
L-elettroforesi tal-ġel tal-agarose hija waħda mit-tekniki ta 'separazzjoni u analiżi l-aktar użati b'mod komuni fil-bijoloġija molekulari. Bħala l-mezz ta 'elettroforesi tal-ġel, agarose għandu l-vantaġġi ta' daqs kbir ta 'pori, firxa wiesgħa ta' separazzjoni u tħaddim sempliċi. Fil-proċess ta 'elettroforeżi, makromolekuli bijoloġiċi bħal DNA, RNA jew proteina jemigraw mill-pori tal-ġell agarose taħt l-azzjoni tal-kamp elettriku. Minħabba d-differenzi fil-ħlas, daqs u forma ta 'molekuli differenti, il-veloċità tal-migrazzjoni tagħhom fil-ġel hija differenti, u b'hekk tinkiseb separazzjoni.
L-elettroforesi tal-ġel tal-agarose tintuża ħafna fil-klonazzjoni tal-ġeni, l-analiżi tal-espressjoni tal-ġeni u l-iskoperta tal-mutazzjoni tal-ġeni. Huwa komunement użat bħala appoġġ jew matriċi fil-kultura taċ-ċelluli. Minħabba l-bijokompatibilità eċċellenti u l-istabbiltà kimika tiegħu, agarose jista 'jipprovdi ambjent ta' tkabbir stabbli għaċ-ċelloli. Pereżempju, fl-esperiment tal-formazzjoni tal-kolonji tal-agar artab, l-agarose jintuża biex jipprepara mezz ta 'kultura semi-solidu biex jiskopri l-kapaċità tal-formazzjoni tal-kolonji taċ-ċelloli, li hija ta' sinifikat kbir għall-evalwazzjoni tal-grad ta 'trasformazzjoni malinna taċ-ċelloli.
Barra minn hekk, agarose jista 'wkoll jiġi kkombinat ma' bijomaterjali oħra biex jipprepara materjali tal-armar komposti għall-użu fl-inġinerija tat-tessuti u l-mediċina riġenerattiva. Il-ġel tal-agarose għandu wkoll rwol importanti fl-immunodiffużjoni u l-immunoelettroforeżi. F'dawn it-teknoloġiji, agarose gel, bħala l-mezz tar-reazzjoni ta 'antiġen u antikorp, jista' jifforma linji jew ċrieki ta 'preċipitazzjoni ċari, li jistgħu jintużaw biex jiskopru u janalizzaw il-preżenza u l-konċentrazzjoni ta' antiġen jew antikorp. Id-daqs tal-pori u l-proprjetà ta 'ċarġ tal-ġel tal-agarose jistgħu jaffettwaw ir-rata tad-diffużjoni u l-effiċjenza tal-irbit tal-antiġen u l-antikorp, għalhekk il-kundizzjonijiet sperimentali jistgħu jiġu ottimizzati billi tiġi aġġustata l-konċentrazzjoni u t-tip ta' agarose.
Applikazzjoni fl-Esperimenti tal-Bijoloġija Molekulari
L-elettroforesi tal-ġel tal-agarose tista 'mhux biss tintuża biex tissepara d-DNA u l-RNA, iżda wkoll tiġi kkombinata ma' teknoloġiji oħra biex tinkiseb il-purifikazzjoni tagħhom. Pereżempju, fil-proċess ta 'estrazzjoni tad-DNA, l-elettroforesi tal-ġel agarose tista' tintuża biex tiskopri l-integrità u l-purità tad-DNA, u mbagħad is-segment tad-DNA fil-mira jista 'jiġi separat mill-ġell permezz ta' qtugħ u rkupru tal-ġel. Dan il-metodu għandu l-vantaġġi ta 'tħaddim faċli u rata għolja ta' rkupru. F'esperimenti ta 'ibridizzazzjoni ta' aċidu nuklejku, ġel agarose jista 'jintuża bħala appoġġ ta' fażi solida biex jiffissa sondi tad-DNA jew RNA fuq il-ġel, u mbagħad ibridizza bl-aċidu nuklejku mira ttikkettat.
Billi tiskopri l-preżenza u l-intensità ta 'sinjali ta' ibridizzazzjoni, il-preżenza u l-konċentrazzjoni ta 'aċidi nuklejċi fil-mira jistgħu jiġu determinati. Id-daqs tal-pori u l-proprjetà ta 'ċarġ tal-ġel tal-agarose jistgħu jaffettwaw l-effiċjenza tal-irbit tas-sonda u l-aċidu nuklejku fil-mira, għalhekk il-kundizzjonijiet tal-ibridizzazzjoni jistgħu jiġu ottimizzati billi tiġi aġġustata l-konċentrazzjoni u t-tip ta' agarose. Polymerase chain reaction (PCR) hija waħda mit-tekniki l-aktar użati komunement fil-bijoloġija molekulari għall-amplifikazzjoni tad-DNA. Fl-analiżi tal-prodotti tal-PCR, l-elettroforesi tal-ġel tal-agarose hija waħda mill-metodi l-aktar użati. Billi jisseparaw il-prodotti tal-PCR permezz tal-elettroforeżi, id-daqs u l-purità tal-frammenti amplifikati jistgħu jiġu skoperti, u b'hekk jiġi ddeterminat jekk ir-reazzjoni tal-PCR hix ta' suċċess u jekk hemmx kwistjonijiet ta' amplifikazzjoni mhux-speċifiċi.
Applikazzjoni fl-Analiżi Bijokimika
Għalkemm id-daqs tal-pori tal-ġel agarose huwa relattivament kbir, mhuwiex adattat biex jissepara proteini molekulari żgħar, iżda xorta jista 'jintuża għas-separazzjoni u l-purifikazzjoni tal-proteini f'xi każijiet. Pereżempju, fl-elettroforeżi tal-ġel preparattiva, il-ġel tal-agarose jista 'jintuża biex jissepara u jippurifika proteini b'piżijiet molekulari akbar.
Barra minn hekk, agarose jista 'wkoll jiġi kkombinat ma' materjali oħra biex jipprepara ġel kompost biex jespandi l-firxa ta 'separazzjoni tiegħu u jtejjeb l-effiċjenza tas-separazzjoni. F'xi esperimenti ta 'determinazzjoni ta' l-attività ta 'l-enzima, il-ġell ta' l-agarose jista 'jintuża bħala trasportatur għall-immobilizzazzjoni ta' l-enżimi. L-immobilizzazzjoni tal-enzima fuq il-ġel tal-agarose tista 'żżomm l-attività u l-istabbiltà tal-enzima u tiffaċilita s-separazzjoni u l-irkupru tal-enzima mir-reaġenti. Dan il-metodu għandu applikazzjonijiet wiesgħa fil-qasam tal-inġinerija tal-enżimi.
Applikazzjoni fil-Mikrobijoloġija
Agarose huwa komunement użat bħala koagulant fil-midja tal-kultura mikrobjali. Meta mqabbel ma 'agar, agarose għandu purità ogħla u kontenut ta' impurità aktar baxx, li jagħmilha aktar adattata għall-kultivazzjoni tal-mikrobi. Meta tħejji medja ta 'kultura solida, dewweb agarose f'ilma sħun, imbagħad żid nutrijenti u antibijotiċi oħra, u kessaħ biex tifforma medja ta' kultura solida.
Dan it-tip ta 'mezz ta' kultura jista 'jipprovdi ambjent ta' tkabbir stabbli għall-mikro-organiżmi, li jiffaċilita l-iżolament, il-purifikazzjoni u l-identifikazzjoni tagħhom. F'esperimenti ta 'identifikazzjoni mikrobijoloġika, ġel agarose jista' jintuża biex jipprepara mezzi ta 'identifikazzjoni speċifiċi. Pereżempju, meta jiġu identifikati batterji intestinali, il-mezz tal-kultura tal-agarose li jkun fih zokkor speċifiku jista 'jintuża biex jiddistingwi tipi differenti ta' batterji billi josservaw il-fermentazzjoni tagħhom taz-zokkor. Barra minn hekk, il-ġel tal-agarose jista 'jintuża wkoll biex jipprepara mezzi ta' reazzjoni bijokimika għall-mikro-organiżmi biex jiskopru l-karatteristiċi metaboliċi u l-attivitajiet tal-enżimi tagħhom.
Il-proċess tal-produzzjoni tal-agarose jista 'jinqasam f'erba' partijiet: trattament minn qabel, estrazzjoni, trattament taċ-ċelluloża DEAE u deidrazzjoni.
Il-materja prima trab ittrattata minn qabel hija mnixxfa direttament f'80C għal 1 / 2 h. l-istrixxa u l-materja prima tal-blokk jinħaslu bl-ilma, jinqatgħu f'biċċiet żgħar, u moħmija.
Estrazzjoni: wara li tħawwad u estratt b'soluzzjoni ta 'l-ester imħallat ta' aċetat tas-sodju ta 'aċidu aċetiku għal diversi sigħat, neħħi l-ilma bil-ġbid, aħsel, imbagħad ħawwad u estratt b'soluzzjoni buffer tal-karbonat tas-sodju tas-sodju għal diversi sigħat, u mbagħad ippumpja, iffiltra u aħsel bl-ilma.
Il-ġell tal-agar estratt mis-soluzzjoni buffer jiġi maħlul f'soluzzjoni ta '4% billi jissaħħan bl-ilma, u mbagħad miżjud b'ċelluloża DEAE għat-tħawwad għal 3-4 sigħat taħt preservazzjoni tas-sħana, u mbagħad ċentrifugat. Il-filtrat jinġabar u jiġi ffiltrat biex tinkiseb soluzzjoni bajda fi stat kollojdali.
Deidrazzjoni: wara li ssaħħan il-filtrat abjad, żid 95% etanol malajr waqt li tħawwad sakemm ma jkunx hemm preċipitazzjoni ovvja, kessaħ sa temperatura tal-kamra, ferra s-soluzzjoni tas-saff ta 'fuq, aħsel u nixxef il-preċipitat biex tikseb il-prodott, b'rendiment ta' 71%.
Irkupru tar-reaġent Irkupru taċ-ċelluloża DEAE: wara ċ-ċentrifugazzjoni, il-preċipitat huwa mgħolli bl-ilma, iffiltrat fuq drapp tal-ħarir malji 100, ripetut diversi drabi sakemm il-filtrat ikun ċar, imbagħad jinħasel b'0.5mol/1 HCI, 0.5mol/1 NaOH u ilma, u mnixxef. Ir-rata ta 'rkupru hija 95% Il-frazzjoni ta' 80 C ġiet miġbura permezz ta 'distillazzjoni diretta ta' soluzzjoni akwea etanolika rkuprata minn soluzzjoni akwea Yichun Imbagħad żid klorur tas-sodju solidu sasaturazzjoni u kompli jiddistilla . 70% jista 'jiġi ċċarġjat. Wara li l-klorur tas-sodju fil-flixkun jiġi evaporat, jista 'wkoll jiġi ċċarġjat bil-valv.
Trab tal-agarosenormalment jissaħħan għal aktar minn 90 grad C biex jinħall fl-ilma. Meta t-temperatura tinżel għal 35-40 grad C, se tifforma ġel semi-solidu tajjeb, li hija wkoll il-karatteristika ewlenija tagħha u l-bażi għal diversi użi. Il-prestazzjoni tal-ġel agarose hija ġeneralment espressa mill-qawwa tal-ġel. Aktar ma tkun għolja l-konċentrazzjoni, aħjar ikun l-effett tal-ġell. Il-ġell ta 'agarose huwa kkawżat mill-eżistenza ta' bond ta 'l-idroġenu. Kwalunkwe fattur li jista 'jeqred ir-rabta tal-idroġenu jista' jwassal għall-qerda tal-ġel. Agarose huwa idrofiliku u kważi kompletament ħieles minn gruppi ċċarġjati. Rari tikkawża denaturazzjoni u adsorbiment għal bijomolekuli sensittivi. Huwa trasportatur inert ideali.
Matul il-preparazzjoni ta 'agarose, huwa meħtieġ li titneħħa l-agarose pectin kemm jista' jkun, inkella jista 'jkun hemm ammont żgħir ħafna ta' sulfat u pyruvate li jissostitwixxi l-gruppi jonizzati fl-agarose, li jista 'jwassal għal electroosmosis (EEO) u jaffettwa l-moviment tal-partiċelli. Il-kontenut tas-sulfat ta '-agarose ta' kwalità għolja huwa relattivament baxx, ġeneralment taħt 0.2%, u l-effett elettroosmotiku tiegħu huwa relattivament żgħir, ġeneralment taħt 0.13. Huwa għalhekk li l-agar jiswa ħafna iktar mill-agar.
Fl-1937, Araki iżola l-ewwel agar mill-agar.
Kien biss fl-1961 li l-hjertin skopra l-ewwel proprjetajiet eċċellenti ta 'agarose, li ġibdet attenzjoni dejjem akbar u bdiet il-produzzjoni industrijali. Agarose huwa użat ħafna fl-ittestjar kliniku, analiżi bijokimika, u separazzjoni ta 'bijomolekuli.
Trab agarose huwa għodda bażika fil-bijoloġija molekulari u l-bijoteknoloġija. Huwa użat ħafna fl-elettroforeżi tal-ġel, kromatografija ta 'affinità, immunodiffużjoni, immunoelettroforeżi u oqsma oħra.
Il-karatteristiċi uniċi tiegħu, bħall-faċilità tal-użu, il-multifunzjonalità, it-tossiċità baxxa, u l-kost-effettività, jagħmluha komponent indispensabbli fir-riċerka tal-laboratorju.
Minkejja l-limitazzjonijiet ta' riżoluzzjoni limitata u fraġilità, l-aħħar avvanzi fit-teknoloġija tal-agar gel, inklużi l--ġell b'riżoluzzjoni għolja, il-ġell prefabbrikat u l-apparat mikrofluwidi bbażati fuq l-agar, espandew il-prattiċità tagħhom u tejbu l-prestazzjoni tagħhom.
Bil-progress kontinwu tar-riċerka xjentifika, it-trab tal-agarose bla dubju se jkompli jkun reaġent siewi u essenzjali fil-kaxxa tal-għodda tal-bijoloġija molekulari u l-bijoteknoloġija.
FAQ
X'inhu agarose u x'inhu l-iskop tiegħu?
L-elettroforeżi tal-ġel tal-agarose wriet li hija mod effiċjenti u effettiv biex tissepara l-aċidi nuklejċi. Is-saħħa għolja tal-ġell ta 'Agarose tippermetti l-immaniġġjar ta' ġellijiet perċentwali baxxi għas-separazzjoni ta 'frammenti kbar tad-DNA.
X'inhu agarose u agar?
Agarose huwa polysaccharide estratt mill-alka (eż. alka ħamra) u l-komponent ewlieni tiegħu huwa polygalactose. Agar jikkonsisti f'agarose u agar pectin flimkien u huwa purifikat biex jikseb agarose. Agarose huwa polimorf lineari, filwaqt li l-agar pectin huwa taħlita eteroġenja ta 'ħafna molekuli iżgħar.
X'inhu t-tifsira ta' agarose?
Agarose huwa definit bħala polisakkarid ta' piż-molekulari- għoli estratt minn alka ħamra tal-baħar, speċifikament agarocytes ta' Rhodophyceae, li jifforma ġellijiet ideali għal studji ċellulari u elettroforeżi tal-ġel minħabba l-bijokompatibilità u l-proprjetajiet ta' ġelazzjoni termo-riversibbli tiegħu.
X'inhu l-għan ewlieni tat-trab tal-agarose?
Użat prinċipalment għall-elettroforesi tal-ġel, l-agarose għandu applikazzjonijiet oħra bħall-kromatografija tal-filtrazzjoni tal-ġel u l-purifikazzjoni tal-affinità. L-aktar użu komuni tiegħu huwa fil-preparazzjoni ta 'ġellijiet ta' agarose, fejn id-daqs tal-pori jiddependi fuq il-konċentrazzjoni ta 'agarose.
It-tags Popolari: agarose trab cas 9012-36-6, fornituri, manifatturi, fabbrika, bl-ingrossa, jixtru, prezz, bl-ingrossa, għall-bejgħ