Long R3 IGF-I(link:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/long-r3-igf-i-cas-143045-27-6.html) hija molekula polipeptidika sintetika li l-istorja tal-iskoperta tagħha bdiet fis-snin sebgħin. F'dak iż-żmien, ir-riċerkaturi bdew jagħtu attenzjoni għar-rwol importanti tal-fattur tat-tkabbir endoġenu-I simili għall-insulina (IGF-I) fil-kontroll tat-tkabbir u l-metaboliżmu, u ppruvaw jiddisinjaw struttura molekulari simili għal IGF-I iżda aktar bijoloġika u farmaċewtika Tip ġdid ta 'molekula peptide b'valur ta' applikazzjoni.
1. L-iskoperta u r-riċerka ta 'IGF-I:
Fil-bidu tas-snin 50, ir-riċerkaturi bdew jesploraw l-eżistenza u l-funzjoni ta 'fatturi ta' tkabbir li jixbħu l-insulina. Fis-snin sittin, xi organizzazzjonijiet ta 'riċerka iżolaw tip ġdid ta' proteina bi proliferazzjoni taċ-ċelluli u attività li tippromwovi t-tkabbir mis-serum tal-annimali, imsejjaħ ormon tat-tkabbir (GH). Aktar tard, ir-riċerkaturi skoprew proteina oħra relatata mill-qrib mal-GH mis-serum tal-annimali u tessuti oħra, imsejħa IGF-I.
IGF-I hija proteina molekulari żgħira li tikkonsisti f'70 residwi ta 'aċidu amminiku, u l-istruttura tagħha hija simili għall-insulina umana. IGF-I huwa prinċipalment sintetizzat mill-fwied, li huwa relatat mill-qrib mal-effetti fiżjoloġiċi tal-GH, u jista 'jirregola l-proliferazzjoni taċ-ċelluli, id-divrenzjar u l-metaboliżmu permezz tal-interazzjoni bejn ir-riċetturi tiegħu stess u r-riċettur tal-fattur tat-tkabbir simili għall-insulina (IGF-IR).
Fis-snin 70, hekk kif ir-riċerka dwar l-IGF-I approfondita, ir-riċerkaturi bdew jesploraw l-istruttura molekulari u l-proprjetajiet bijoloġiċi tiegħu, u ppruvaw jiżviluppaw molekula analoga IGF-I aktar siewja.
2. Skoperta u riċerka ta 'R3 IGF-I twil:
Mill-aħħar tas-snin sebgħin sal-bidu tas-snin tmenin, xi riċerkaturi bdew jimmodifikaw is-sekwenza N-terminal ta 'IGF-I u ddisinjaw analogu IGF-I bi struttura molekulari aktar stabbli u sinteżi u użu aktar faċli. Fuq din il-bażi, twil R3 IGF-I twieled.
Long R3 IGF-I juża arabinosyl-Ala-Pro-Ala (Apa) biex jissostitwixxi s-sekwenza Gln-Pro-Arg-Gly ta 'IGF-I endoġenu, li jirriżulta f'half-life itwal fil-plażma, u Mhux marbut u mneħħi faċilment minn Proteina li torbot IGF (IGFBP). Barra minn hekk, ir-R3 IGF-I twil ġie wkoll immodifikat billi żiedet 13-il sekwenza ta' aċidu amminiku (inkluż Arg-Lys-Glu-Gly-Ser) fit-tmiem C, introduzzjoni ta' rabtiet disulfide u strutturi -helical, eċċ., sabiex ikun għandu attività bijoloġika ogħla u potenzjal għal applikazzjoni farmaċewtika.
Matul ir-riċerka u l-iżvilupp ta 'R3 IGF-I twil, xi riċerkaturi ppruvaw ukoll itejbu l-effiċjenza tal-espressjoni u l-ispiża tal-produzzjoni tagħha permezz ta' teknoloġija transġenika u mezzi oħra. Pereżempju, twil R3 IGF-I ġie espress minn sistemi mikrobjali bħal Escherichia coli u ħmira, u purifikat u separat permezz ta 'trattament bl-aċidu, kromatografija kontrakurrent u teknoloġiji oħra, u finalment inkiseb prodott twil R3 IGF-I ta' purità għolja.
Matul il-proċess twil ta 'riċerka, skont l-istruttura speċjali ta' LONG R3 IGF-I, li hija molekula polipeptide simili fl-istruttura għal IGF-I endoġenu u għandha 13-il aċidu amminiku addizzjonali, ġew studjati diversi metodi sintetiċi għall-produzzjoni. Il-proċess ta 'preparazzjoni ta' R3 IGF-I twil prinċipalment għandu l-metodi li ġejjin:
1. Metodu ta 'sinteżi kimika:
Sintesi kimika hija waħda mill-metodi l-aktar komunement użati għall-preparazzjoni twila R3 IGF-I. Is-sinteżi kimika ta 'R3 IGF-I twil twettqet ibbażata fuq is-sekwenza magħrufa ta' aċidu amminiku ta 'IGF-I, u 13-il sekwenza ta' aċidu amminiku addizzjonali miżjuda fit-tmiem N ta 'R3 IGF-I twil. Is-sinteżi teħtieġ l-użu ta 'gruppi ta' protezzjoni multipli biex tiżgura selettività ta 'aċidu amminiku u effiċjenza ta' reazzjoni. Normalment, is-segment tal-peptide protett tal-aċidu amminiku fil-mira huwa l-ewwel ippreparat permezz ta 'sinteżi ta' fażi solida, u mbagħad immuntat f'molekula twila R3 IGF-I permezz ta 'sinteżi ta' fażi likwida.
2. Att dwar il-Bijoteknoloġija:
Il-metodu tal-bijoteknoloġija juża prinċipalment ċelluli inġinerija biex jesprimi proteini rikombinanti, u jesprimi LONG R3 IGF-I billi jbiddel is-sekwenzi tal-ġeni u l-vetturi tal-espressjoni. F'dan il-metodu, il-ġene LONG R3 IGF-I jista 'jiġi introdott fiċ-ċellula ospitanti għall-espressjoni permezz tat-teknoloġija tar-rikombinazzjoni tal-ġeni, vettur lentivirali, vettur tal-plasmid u simili. Dan il-metodu jista 'jipproduċi ammont kbir ta' LONG R3 IGF-I, u jista 'wkoll jottimizza l-espressjoni u l-effett ta' purifikazzjoni tiegħu billi jibdel is-sekwenza tas-sinjal tal-vettur u t-tnixxija.
3. Metodu enżimatiku:
Il-metodu enżimatiku juża prinċipalment enzimi speċifiċi bħal pepsin u enzima tal-muskolu tal-arzella biex jaqsam il-proteina prekursur twila R3 IGF-I biex tikseb il-monomeru LONG R3 IGF-I, filwaqt li jevita prodotti sekondarji bla bżonn. F'dan il-metodu, il-matriċi li fiha l-proteina prekursur twila R3 IGF-I jeħtieġ li tinkiseb l-ewwel, u mbagħad tirreaġixxi f'temperatura xierqa billi żżid enżimi u kontroll tal-pH, eċċ., Biex finalment tinkiseb is-sustanza fil-mira LONG R3 IGF-I.
4. Metodu ta 'modifika tal-proteini:
Il-metodu ta 'modifika tal-proteini prinċipalment juża l-IGF-I endoġenu sintetizzat biex jimmodifikah biex jinkiseb l-effett ta' R3 IGF-I twil. F'dan il-metodu, l-N-terminal ta 'IGF-I endoġenu normalment jiġi introdott fi 13-il sekwenza speċifika biex ikollha l-effett ta' R3 IGF-I twil. Barra minn hekk, l-attività bijoloġika u l-half-life ta 'R3 IGF-I twil jistgħu jittejbu aktar billi jinbidel il-grupp C-terminal.
Fil-qosor, il-metodi ta 'sinteżi ta' R3 IGF-I twil jinkludu sinteżi kimika, bijoteknoloġija, modifika enżimatika u proteina, u kull metodu għandu l-vantaġġi, l-iżvantaġġi u l-ambitu tal-applikazzjoni tiegħu. Bl-iżvilupp kontinwu tat-teknoloġija tas-sinteżi kimika, it-teknoloġija tal-inġinerija ġenetika u oqsma oħra, it-teknoloġija tal-preparazzjoni ta 'R3 IGF-I twila se titjieb u titjieb ukoll aktar.