Fluorescein isotiocjanatAħmar oranġjo, Isothiocyanate Fluworexxenti Isfar, Isothiocyanate Fluworexxenti Aħmar, Isothiocyanate Fluorescein Isomer I, {5- isothiocyanate fluorescein {. Powder isfar {} isfar . Huwa Hygroscopic . L-antikorp wara li jorbot ma jitlifx l-ispeċifiċità li jorbot ma 'ċertu antiġen . xorta għandu fluworexxenza ħadra qawwija fis-soluzzjoni alkalina . wara li żżid l-aċidu, hija tippreċipita, u l-fluworexxenza tispari Reaġent bijokimiku kif ukoll mediċina dijanjostika medika, li tista 'malajr tiddijanjostika mard ikkawżat minn batterji, viruses, parassiti, eċċ . Barra Aċidu, jippreċipita, u l-fluworexxenza tisparixxi, u hija kemmxejn solubbli fl-aċetun, l-etere u l-ether tal-pitrolju .
|
Formula kimika |
C21H11NO5S |
|
Massa eżatta |
389 |
|
Piż molekulari |
389 |
|
m/z |
389 (100.0%), 390 (22.7%), 391 (4.5%), 391 (2.5%), 391 (1.0%), 392 (1.0%) |
|
Analiżi Elementali |
C, 64.78; H, 2.85; N, 3.60; O, 20.54; S, 8.23 |
|
|
|
Studju dwar il - proprjetajiet ta 'Fluorescein isothiocyanateInsulina ttikkettjata għal ġelatina aminata u l-applikazzjoni tagħha fl-amministrazzjoni tal-mukoża nażali:
Taħt il-kundizzjoni ta 'l-ebda emulsifikant estern, is-soluzzjoni milwiema ta' ġelatina aminata kienet imxerrda fiż-żejt taż-żebbuġa, u tip ġdid ta 'mikrosferi tal-ġel iċċarġjati b'mod pożittiv, aminati mikrosferi tal-ġelatina, ġiet ippreparata permezz tal-proċessi ta' emulsifikazzjoni, gelling, deidrazzjoni u cross-linking . 40-50 μ m . Id-daqs huwa distribwit indaqs . Il-mikrosferi mnixxfa jistgħu jassorbu madwar 20 darba tal-piż tagħhom stess biex jiffurmaw hydrogels . mikrosferi tal-ġelatina aminoated għandhom kontenut amminiku ogħla minn ġelatina {}} soluzzjoni ta 'ilma distillat u fosfat, u l-potenzjal ta' zata f'ilma distillat huwa 41 . 5 mV.
Biż-żieda tal-konċentrazzjoni tal-glutaraldehyde jew l-estensjoni tal-ħin ta 'reazzjoni ta' crosslinking, il-kontenut amminiku ta 'mikrosferi naqas . Madankollu, irrispettivament mill-kundizzjonijiet ta' reazzjoni ta 'crosslinking, il-mikrosferi tal-ġelatina aminati mħejji degradat malajr (<1h) in the presence of trypsin, but slowly (>20h) fil-pepsin u l-aċidu-bażi medju . l-interazzjoni bejn il-mikrosferi tal-ġelatina aminati u l-mucin hija aktar b'saħħit Mikrosferi tal-ġelatina aminati ġew studjati permezz ta 'metodu ta' tikkettar ta 'fluworexxenza u teknoloġija ta' degradazzjoni ta 'l-enzimi in vitro, bl-użu ta' mudell ta 'ħasil ta' perfużjoni gastrika ta 'far iżolat u esperiment in vivo fil-firien .
Ir-riżultati wrew li taħt l-istess kundizzjonijiet sperimentali, l-għadd ta 'mikrosferi tal-ġelatina aminati miżmuma fl-istonku tal-far iżolati kien aktar minn dak ta' mikrosferi tal-ġelatina, u t-tip ta 'soluzzjoni ta' tisqija (meraq gastriku artifiċjali jew PH7 tal-fosfat tal-bniedem PH7) ma kellu l-ebda effett sinifikanti fuq l-eżekuzzjoni gastrika ta 'mikrosfi, li rriżulta li l-interazzjoni elettrostatika bejn il-mikrosferi Il-mukus ma kienx il-fattur deċiżiv għaż-żamma gastrika ta 'mikrosferi f'dan il-mudell . Madankollu, fl-esperiment, instab li l-ammont ta' mikrosferi tal-ġelatina aminati miżmuma fl-istonku tal-firien iżolat naqas biż-żieda tal-konċentrazzjoni tal-aġent crosslinking Glutartaldehyde meta tħejji l-mikrosferi L-adeżjoni tal-mikrosferi tal-ġelatina aminati tista 'tkun affettwata mill-kontenut amminiku fuq il-wiċċ tal-mikrosferi jew il-grad ta' crosslinking .
Ir-riżultati sperimentali in vivo fil-firien urew li l-mikrosferi tal-ġelatina amino kellhom adeżjoni mukosat aħjar minn mikrosferi tal-ġelatina . l-effetti ta 'ġelatina aminata fuq l-assorbiment nażali ta' glukan u insulina ġew investigati f'friit b'saħħithom . ir-riżultati wrew li 0 . Il-ġelatina tista 'tippromwovi b'mod sinifikanti l-assorbiment ta' fluorescein isothiocyanat glucan mill-mukoża nażali tal-far b'bijodisponibilità ta '23 . 8%. Wara l-għoti intranasali ta '10 buffer tal-fosfat ta 'l-insulina IU li fih 0 2% (w / v) ġelatina amminiku, il-livell ta' glukosju fid-demm kien sinifikament inqas minn dak tal-buffer tal-fosfat ta 'l-insulina.
Fluorescein isothiocyanate(FITC), bħala reaġent klassiku ta 'tikkettar fluworexxenti, sar għodda indispensabbli fl-oqsma tal-bijoloġija, il-mediċina, u x-xjenza tal-materjali minħabba r-rendiment quantum għoli tagħha, fotostabilità eċċellenti, u bijokompatibilità tajba .
Il-grupp isothiocyanate (- n=c=s) ta 'FITC jista' jgħaddi minn reazzjonijiet kovalenti ma 'gruppi attivi bħal gruppi ta' amino u tiol fil-bijomolekuli, li jiffurmaw kumplessi ta 'tikkettjar fluworexxenti stabbli {. Din il-karatteristika tagħmilha r-reaġent preferut għall-proteina, u l-aċidu nukleiku, u l-peptide Tikkettar .
Tikkettar tal-proteini u riċerka funzjonali
FITC jikseb ittikkettjar speċifiku billi jorbot ma 'residwi ta' lysine ta 'proteini bħal antikorpi u lectins . Pereżempju, f'esperimenti ta' immunofluworexxenza, l-antikorpi bit-tikketta FITC jistgħu jorbtu mal-antiġeni tal-wiċċ taċ-ċellula u janalizzaw kwantitattivament livelli ta 'espressjoni ta' antigen permezz ta 'mikroskopja fluworexxenti jew ċitometrija}}} L-intensità tal-fluworexxenza tal-konjugat FITC IgG hija relatata lineari mal-konċentrazzjoni tal-antiġen, u s-sensittività tal-iskoperta tista 'tilħaq il-livell Danak . Barra minn hekk, proteini bit-tikketta FITC jistgħu jintużaw ukoll għal studji ta' interazzjoni ta 'proteina, bħal analiżi ta' bidliet konformazzjonali tal-proteina permezz ta 'trasferiment ta' reżonanza fluworexxenza (FRET) Teknoloġija}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}
Tikkettar tal-aċidu nuklejku u ibridizzazzjoni molekulari
FITC jista 'jiġi modifikat kimikament biex tikketta t-tarf ta' 5 'jew 3' ta 'aċidi nuklejiċi għal fluworexxenza ta' ibridizzazzjoni in situ (ħut) teknoloġija . Fir-riċerka tal-kanċer, is-sondi bit-tikketta FITC jistgħu jorbtu speċifikament ma 'reġjuni anormali kromożomiċi biex jgħinu fid-dijanjosi ta' mard ematoloġiku bħal leukemia u l-linfoma .}} Il-ġeni tal-fużjoni BCR-ABL jistgħu juru sinjali fluworexxenti sofor fin-nuklei taċ-ċelloli interfażi b'rata ta 'eżattezza ta' aktar minn 95% .
Tikkettar tal-peptidi u konsenja tad-droga
Il-peptidi bit-tikketta FITC għandhom rwol importanti fis-sistemi tal-kunsinna tad-droga . li jieħdu M2PEP-FITC bħala eżempju, din il-molekula hija magħmula minn peptide M2PEP immirat u grupp fluworexxenti FITC, li jista 'jirrikonoxxi speċifikament ir-riċetturi tal-wiċċ taċ-ċelloli tat-tumur u jikseb konsenja ta' mediċina mmirata It-tessuti tat-tumur huwa 3 . 2 darbiet dak ta 'mediċini ħielsa, li jtejjeb b'mod sinifikanti l-effikaċja terapewtika u jnaqqas l-effetti sekondarji.
Il-proprjetajiet ta 'fluworexxenza ta' FITC jagħmluha "l-istandard tad-deheb" fil-qasam tad-dijanjostiċi in vitro, użati ħafna f'tekniki bħal immunokromatografija, ċitometrija tal-fluss, u ELISA {.
Sejbien rapidu ta 'patoġeni
Antikorpi bit-tikketta FITC jistgħu jintużaw għal dijanjosi rapida ta 'infezzjonijiet batteriċi, virali u parassitiċi . Pereżempju, fid-dijanjosi tal-malarja, FITC bit-tikketta ta' antikorpi anti-malarja jorbtu mal-ħin tad-demm tal-pazjent, u s-sinjal ta 'fluworexxenza ħadra tal-parassita huwa osservat permezz ta' fluworexxenza. il-ħin ta 'detezzjoni Metodi tradizzjonali għal 15-il minuta, u s-sensittività tilħaq 98% . Barra minn hekk, sondi ta 'aċidu nuklejiku bit-tikketta FITC jistgħu jintużaw ukoll biex jinstabu aċidi nuklejiċi tal-virus respiratorju, bħalma huma l-ġene ORF1AB ta' SARS-COV -2, bi speċifiċità ta '99 . 2%.
Markaturi tat-tumur
Fiċ-ċitometrija tal-fluss,fuorescein isothiocyanateAntikorpi anti-CD45 bit-tikketta jistgħu jiddistingwu ċelloli tal-lewkimja miċ-ċelloli tad-demm normali . Id-dejta turi li r-rata pożittiva ta 'antikorpi CD34 bit-tikketta FITC fid-dijanjosi ta' lewkimja majelojde akuta (AML) hija 85%, li hija 20% ogħla mill-eżami morfoloġiku tradizzjonali . f'termini ta 'skrin ta' tumuri Ċelloli (CTC) teknoloġija ta 'skoperta tista' taqbad ċelloli tat-tumur f'konċentrazzjonijiet estremament baxxi fid-demm periferali, li tipprovdi metodu ġdid għal dijanjosi bikrija ta 'tumuri solidi bħal kanċer tas-sider u kanċer tal-pulmun {.
Dijanjosi ta 'mard awtoimmuni
Fit-teknoloġija ELISA, l-autoantikorpi bit-tikketta FITC (bħal antikorpi anti-nukleari u antikorpi tad-DNA kontra d-doppju) jistgħu jintużaw għad-dijanjosi ta 'mard bħal esperimenti sistemiċi ta' lupus eritematosu (SLE) {. esperimenti wrew li FITC-ELISA għandu sensittività ta '92% u speċifika ta' 95% li huwa ferm aħjar mill-metodi tradizzjonali ta 'immunofluworexxenza .
Il-permeabilità taċ-ċellula u t-tossiċità baxxa ta 'FITC jagħmluha għodda ideali għall-immaġini taċ-ċelluli, użata ħafna fil-lokalizzazzjoni ta' organelli, osservazzjoni tad-diviżjoni taċ-ċelluli, u riċerka ta 'apoptożi {.
Tikkettar ta 'organelli taċ-ċellula u osservazzjoni dinamika
Sondi mitokondrijali bit-tikketta FITC (bħal mitotracker aħdar) jistgħu jorbtu speċifikament mal-potenzjal tal-membrana mitokondrijali u jimmonitorjaw bidliet morfoloġiċi mitokondrijali fir-riċerka ta 'ħin reali . fir-riċerka newronali, FITC bit-tikketta ta' l-antikorpi tal-proteina mikrotubuli jistgħu juru l-estensjoni dinamika tal-koni tat-tkabbir tal-fus. Barra minn hekk, sondi lisosomi bit-tikketta FITC (Lysotracker Green) jistgħu jintużaw ukoll biex jistudjaw proċessi ta 'awtofagija, li jikkwantifikaw in-numru ta' awtofagoġomi permezz ta 'bidliet fl-intensità tal-fluworexxenza .
Ċiklu taċ-ċellula u analiżi tal-apoptożi
Fiċ-ċitometrija tal-fluss, FITC bit-tikketta tal-jodur tal-propidju (PI) jista 'jorbot ma' DNA u jiddistingwi stadji differenti taċ-ċiklu taċ-ċellula (g {0 / g1, s, s, g2 / m) bl-intensità tal-fluworexxenza {. dejta sperimentali turi li s-sensittività tal-metodu tat-tebgħa FITC-PI biex tiskopri l-apoptożi taċ-ċellula Trypan Blue Steining Method . Barra minn hekk, FITC ittikkettat l-annexin V sondi jistgħu jorbtu speċifikament ma 'fosfatidilserina esposta fuq il-wiċċ taċ-ċelloli apoptotiċi, u jiksbu identifikazzjoni preċiża taċ-ċelloli apoptotiċi bikrija .
Riċerka dwar il-migrazzjoni taċ-ċelluli u l-invażjoni
Fl-esperimenti ta 'Transwell, iċ-ċelloli bit-tikketta FITC jistgħu jimmonitorjaw il-proċess ta' migrazzjoni f'ħin reali . Pereżempju, fl-istudju ta 'metastażi tat-tumur, ir-rata ta' migrazzjoni ta 'ċelloli tal-kanċer tas-sider bit-tikketta FITC (MCF -7) permezz tal-kolla matriċi hija korrelata b'mod pożittiv mal-abilità ta' invażjoni, li tipprovdi indikaturi kwantitattivi għall-iskrinjar ta 'l-iskrin ta' l-iskrin ta 'l-antiki.
FITC għandu rwoli multipli fl-iżvilupp tal-mediċina, inkluża l-validazzjoni tal-mira, l-evalwazzjoni tas-sistema tal-kunsinna tal-mediċina, u studji farmakokinetiċi .
Validazzjoni tal-Mira u Mekkaniżmu ta 'Riċerka dwar l-Azzjoni
Inibituri ta 'molekula żgħira bit-tikketta FITC jistgħu jintużaw biex jivvalidaw il-miri tad-droga . Pereżempju, inibituri ta' EGFR bit-tikketta FITC (bħal gefitinib) jistgħu juru l-irbit ta 'mediċini ma' riċetturi EGFR fuq il-wiċċ taċ-ċelloli tat-tumur, li jikkwantifikaw l-affinità li torbot (valur kd) permezz ta 'intensità fluworexxenti {1} tintuża biex tistudja l-effiċjenza tas-silenzjar tal-ġeni, u tipprovdi bażi għal terapija ta 'interferenza RNA .
Evalwazzjoni tas-sistema tal-kunsinna tal-mediċina
Nanopartiċelli bit-tikketta FITC (bħal liposomi u mikrosferi tal-polimeru) jistgħu jimmonitorjaw id-distribuzzjoni u l-imġieba tar-rilaxx ta 'mediċini in vivo f'ħin reali .
Esperimenti wrew li l-akkumulazzjoni ta 'liposomi pegylated bit-tikketta FITC fit-tessuti tat-tumur hija 2 . 8 darbiet dik ta' mediċini b'xejn, u s-sinjal ta 'fluworexxenza jista' jdum għal 24 siegħa, li jipprovdi dejta viżwali għall-ottimizzazzjoni ta 'sistemi ta' konsenja ta 'mediċini.
Studji farmakokinetiċi u tossikoloġiċi
Molekuli tad-droga bit-tikketta FITC jistgħu jiġu analizzati kwantitattivament għall-assorbiment, id-distribuzzjoni, il-metaboliżmu, u l-eskrezzjoni (ADME) proċessi in vivo permezz ta 'teknoloġija tal-immaġini fluworexxenza . Pereżempju, l-intensità tal-fluworexxenza ta' antibijotiċi bit-tikketta FITC (bħal vanomycin) fil-vanomiċina) fil-kidneys hija relatata ma 'droga, li tipprovdi bażi ta' ottimizzazzjoni Dożaġġ . Barra minn hekk, l-assaġġi taċ-ċitotossiċità bit-tikketta FITC jistgħu wkoll jevalwaw il-ħsara tal-mediċini f'ċelloli normali u jiggwidaw l-evalwazzjonijiet tas-sigurtà .
Il-karatteristiċi tar-rispons tal-fluworexxenza tal-FITC jagħmluha applikabbli b'mod uniku fil-qasam tax-xjenza tal-materjali, inkluż l-iżvilupp ta 'sensuri tal-pH, sensuri tat-temperatura, u sondi tal-joni tal-metall .
Sensor tal-fluworexxenza li jirrispondi għall-pH
L - intensità tal-fluworexxenza ta 'Fluorescein isothiocyanate is significantly affected by the pH value of the solution. In weakly acidic environments (pH 5.0-6.5), protonation of FITC groups leads to increased fluorescence intensity; Under alkaline conditions (pH>8 . 0), il-fluworexxenza hija mkessħa . ibbażata fuq din il-karatteristika, in-nanopartiċelli modifikati FITC jistgħu jintużaw biex jimmonitorjaw il-fluttwazzjonijiet ta 'aċidu intraċellulari {. per eżempju, l-intensità tal-fluworexxenza tal-kumpless tal-biliribin FITC fil-mikroenvironvment dijanjosi.
Sonda fluworexxenti li tirrispondi għat-temperatura
Il-ħajja tal-fluworexxenza ta 'FITC tinbidel bit-temperatura . taħt kondizzjonijiet ta' temperatura baxxa (4 grad), il-ħajja tal-fluworexxenza ta 'mikrosferi tal-polimeru bit-tikketta FITC hija estiża għal 5 . 2 nanosekondi, li hija 1 {. 8 darbiet ogħla mit-temperatura tal-kamra (25 grad). Din il-karatteristika tagħmilha għodda ideali għall-istudju tal-proċessi ta 'transizzjoni tal-fażi u l-krijopreservazzjoni taċ-ċelloli.
Sonda ta 'skoperta ta' joni tal-metall
FITC inaqqas b'mod sinifikanti l-intensità tal-fluworexxenza meta kkombinata ma 'joni tal-metall bħal Cu ² u Hg ² ⁺, li jagħmilha adattata għall-monitoraġġ ambjentali . Pereżempju, in-nanopartiċelli tal-ġel tas-silika Modifikati FITC għandhom limitu ta' skoperta ta '0 . 1 nm għal Hg ², li hija 100 darbiet ogħla minn spettru ta' assorbizzjoni atomika.
L-applikazzjoni tal-FITC fil-kamp agrikolu qiegħda tespandi gradwalment, inkluż is-sejbien tal-virus tal-pjanti, id-dijanjosi tal-mard tal-annimali, u l-identifikazzjoni tal-purità tal-varjetà .
Sejbien rapidu tal-viruses tal-pjanti
Antikorpi tal-virus bit-tikketta FITC jistgħu jintużaw biex jindividwaw virus tal-mużajk tat-tabakk (TMV), virus tal-mużajk tal-ħjar (CMV), u viruses oħra . esperimenti wrew li s-sensittività ta 'FITC-ELISA għall-iskoperta ta' TMV hija 0 . 1 ng / ml, li Metodi . Barra minn hekk, sondi ta 'aċidu nuklejku bit-tikketta FITC jistgħu jintużaw ukoll biex jindividwaw ġeni eżoġeni f'uċuħ modifikati ġenetikament, bħal ġeni BT reżistenti għall-insetti.
Dijanjosi ta 'mard ta' l-annimali
Antikorpi bit-tikketta FITC jistgħu jintużaw biex jikxfu virus tad-deni tal-ħnieżer (CSFV), virus tal-influwenza tat-tjur (AIV), u viruses oħra .
Fid-dijanjosi tad-deni tal-ħnieżer, FITC ittikkettat antikorpi anti CSFV jorbtu ma 'sezzjonijiet tat-tessuti u josservaw id-distribuzzjoni tal-virus permezz ta' mikroskopija ta 'fluworexxenza, li jnaqqsu l-ħin ta' skoperta minn metodi tradizzjonali ta '3 ijiem sa 6 sigħat . F’żieda, żieda ta ’ċitometrija tal-fluss FITC tista’ tintuża wkoll biex tiskopri ċelloli T speċifiċi għall-annimali fid-demm tal-annimali u evalwa
Identifikazzjoni tal-Purità tal-Varjetà
Sondi tad-DNA bit-tikketta FITC jistgħu jintużaw biex tidentifika l-purità tal-varjetajiet tal-għelejjel . Pereżempju, is-sonda FITC li timmira r-ross tal-marda tar-ross tal-ġene tal-marda pi tista 'tiddistingwi b'mod preċiż bejn homozygotes u heterozygotes fiż-żerriegħa tar-ross ibridi, bi preċiżjoni ta' identifikazzjoni ta 'purità ta' 99 . 5% {{{3} Markers molekulari SSR bit-tikketta jistgħu jintużaw ukoll għall-analiżi tad-diversità ġenetika tar-razez tal-bhejjem u tat-tjur, li jipprovdu bażi xjentifika għat-trobbija.
Sintesi ta 'FITC: 4- anhydride nitrofthalic (ara C8H3NO5, [{5466-84-2]) tirreaġixxi bir-resorcinol f' 195-200 grad C għal 10H, ċiklizza f'taħlita ta '3' nitrofluorescein anhydride, idroliz b'soluzzjoni ta 'etanol ta' idrossidu tas-sodju saturat, 4 "nitrofluworescein huwa miksub Fluorescein . L-iktar radikali huwa aċilat u eliminat biex jiksebFluorescein isothiocyanate.
Prodott pur FITC huwa trab kristallin isfar jew oranġjo, li jinħall faċilment fl-ilma u l-alkoħol solvent . Hemm żewġ iżomeri, li fosthom it-tip I isomer huwa aħjar fl-effiċjenza, l-istabbiltà u l-proteina li torbot . il-piż molekulari ta 'FITC huwa 389 . 4, il-wavelength massimu It-tul ta 'mewġa ta' emissjoni massima huwa ta '520 ~ 530 nm, li juri fluworexxenza aħdar isfar jgħajjat . FITC jista' jinħażen għal ħafna snin f'postijiet kesħin, skuri u niexfa, u huwa l-aktar fluworexxina użata ħafna . Il-vantaġġ ewlieni tiegħu huwa li l-għajn tal-bniedem hija aktar sensittiva għall-aħdar isfar, u l-fluworexxenza fit-taqsima hija ġeneralment inqas minn Red.
It-tags Popolari: Fluorescein isothiocyanate cas 27072-45-3, fornituri, manifatturi, fabbrika, bl-ingrossa, xiri, prezz, massa, għall-bejgħ